植物组织中可溶性糖含量的测定

原理：糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量测定。

实验材料任何植物鲜样或干样。

试剂80%乙醇

葡萄糖标准溶液（100μg/mL）:准确称取100mg分析纯无水葡萄糖，溶于蒸馏水并定容至100mL,使用时在稀释10倍（100μg/mL）。

蒽酮试剂称取1.0g蒽酮，溶于80%浓硫酸（将98%浓硫酸稀释，把浓硫酸缓缓加入到蒸馏水中）1000mL中，冷却至室温，贮于具塞棕色瓶内，冰箱保存，可使用2~3周。

仪器设备分光光度计，分析天平，离心管，离心机，恒温水浴，试管，三角瓶，移液管，剪刀，瓷盘，玻棒，水浴锅，电炉漏斗，滤纸。

实验步骤

1.样品中可溶性糖的提取称取剪碎混匀的新鲜样品0.5~1.0g（或干样粉末5~100mg），放入大试管中，加入15mL蒸馏水，在沸水浴中煮沸20min，取出冷却，过滤入100mL容量瓶中，用蒸馏水冲洗残渣数次，定容至刻度。

2.标准曲线制作取6支大试管，从0~5分别编号，按表加入各试剂。表蒽酮法测可溶性糖制作标准曲线的试剂量

试剂管号

0 1 2 3 4 5

100μg/mL葡萄糖溶液

（mL）

0 0.2 0.4 0.6 0.8 1

蒸馏水（mL） 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0

蒽酮试剂（mL） 5 5 5 5 5 5

葡萄糖量（μg）0 20 40 60 80 100

将各管快速摇动混匀后，在沸水浴中煮10min，取出冷却，在620nm波长下，用空白调零，测定光密度，以光密度为纵坐标，含葡萄糖量（μg）为横坐标绘制标准曲线。

3.样品测定取待测样品提取液1.0mL加蒽酮试剂5mL，同以上操作显色测定光密度。

重复3次

4.结果计算溶性糖含量（%）=从标准曲线查得糖的量（μg）×提取液体积（ml）×稀释倍数/[测定用样品液的体积（ml）×样品重量（g）×106]/100 式中：C——从标准曲线查得葡萄糖量，μg。V T——样品提取液总体积，mL。V1——显色时取样品液量，mL。W——样品中（g）。