单克隆抗体就是将经过处理的病菌或肿瘤细胞注射给小鼠后,会经由小鼠(也可以是其他免疫动物)免疫系统产生与之对应的效应B细胞,这些B细胞通过和小鼠的骨髓瘤细胞结合形成杂交瘤细胞并在体外产出抗体。由单一B细胞复制形成的细胞群产生的抗体就被称为单克隆抗体,被广泛用于药物、疫苗、实验室检测试剂的制备。
1995年的3月1日,是单克隆抗体研制法的发明者G·J·F克勒(G·J·F Kohler)离世的日子,他的发明开启了生物制剂的新篇章,是一位分量足以载入史册的科学家。如果大家觉得上面的话语过于生涩,就请让我简单地再介绍一下吧。
抗原和抗体
想要理解何为单克隆或多克隆抗体,我们先要了解一下抗原和抗体之间的关系。
抗原和抗体是一对冤家。抗原一般都是外来物携带的特异性部分,有时候也可能是外来物的本身,我们可以理解是一种身份识别信息。当外来物侵入我们人体后,如果是初来乍到,那我们的机体会有一个适应的过程,并逐渐根据侵入物的特点酝酿击溃它们的办法,这就是抗体生成的过程。
而如果这个外来物身上的抗原被我们识别为老朋友,那么早已储备好的抗体们就会马上出动,在识别这些抗原后,一方面直接开始抑制外来物的活性;另一方面呼朋唤友,将免疫大军引至此地,实施打击。在对应关系上,一种抗原在大多数情况下只对应一种抗体,此为抗原-抗体的特异性。
所以我们可以简单地把身体免疫系统工作的原理看作是抗原和抗体的斗智斗勇:外来侵入物费尽心思隐藏抗原的识别位点,而抗体则一心想要直搞黄龙,消灭入侵者。而根据这个机制,聪明的科学家们由此发明了一些特异性的诊断或治疗的手段,多克隆抗体和单克隆抗体就是他们的成果。
抗体的妙用
科学家们通过研究抗原-抗体反应很快就发现,他们可以利用抗原和抗体这种特异性结合的特性大做文章。
首先,可以把抗原-抗体机制用在病原体检测上,比如我们最为常见的抗原抗体凝集试验:通过将分离出的病原菌与患者血清做抗原抗体凝集试验,就可以做出实验室诊断,被称为血清学诊断。最常见的血清学诊断应该就是临床上常用来辅助诊断风湿热的抗链球菌溶血素O试验了吧,简称抗O检查。
其次,我们还可以把抗体作为一枚精确制导炸弹的信号识别装置,通过特异性识别肿瘤细胞或其他病原体的抗原,对侵入物进行定点打击,被称为导向治疗。治疗风湿病的英夫利昔单抗就是此类药品。
最后,也是我们最为熟悉的一个应用场景就是疫苗了。我们都知道,一些流行性疾病或传染病都有对应的疫苗,这些疫苗就是通过植入灭活或减毒的抗原,让身体提前产生相应病原物的抗体。这样当病原物,比如说乙肝病毒,有机会侵入我们体内时,会迅速被严阵以待的免疫系统直接消灭,不留痕迹。
以上是三个关于抗体为我们做出的贡献,那么接下来我们就看看,单克隆抗体研制的成功是多么伟大的一件事情。
单克隆抗体的意义
既然抗体有如此多的妙用,那么能够批量生产某一种特定的抗体成为了研究者们接下来攻克的对象。
1975年,分子生物学家G.J.F.克勒和他的同伴C.米尔斯坦发现,能够产生抗体的B淋巴细胞到了体外环境下就没了用,而骨髓瘤细胞在体外培养下却能不断增殖,保持活性。他们通过将这两种细胞融合在一起,就形成了能在体外环境下产生特定抗体的杂交瘤细胞。
他们通过在小鼠体内注射特定的抗原,刺激分泌相应抗体的B淋巴细胞产生,而后通过培养杂交瘤细胞来获取稳定的细胞群。通过对这些杂交瘤细胞的多次培养筛选,最终选择出合适的细胞群进行抗体的批量制备。由于筛选出来的细胞群是由同一个杂交瘤细胞分裂成的,因此被称为单克隆抗体。它具备了抗体单一,纯度高,未变异的特点,极具医学应用价值。
单克隆抗体的诞生解决了抗体精细化批量生产的难题,为未来生物制剂、实验室检测、疫苗研制的进一步发展和应用打下了夯实的基础,克勒和米尔斯坦二人也因为这个杰出的贡献获得了1984年的诺贝尔生理学或医学奖。
球蛋白是一种能提高人体免疫力的药物。效果因人而异。一般一次可以持续10个月左右。但这样一来,抗体本身也会产生一定的影响。注射球蛋白可以作为抗原,刺激人体产生抗球蛋白抗体,即抗抗体。一旦再次注射球蛋白,就会被抗球蛋白中和,不能发挥其抗病作用。
免疫球蛋白是一种能增强人体免疫力的药物。效果很好,尤其是进口的。一次给药约10个月,但这样也会对自身抗体产生一定的影响,一般不会产生副作用。一般没有不良反应,少数人注射部位会有红肿、疼痛反应,体温低,无需特殊治疗,可自行恢复。
安卡拉病的防治
作者:鲁双林
来源:《中国动物保健》2017年第08期
摘要:鸡安卡拉病是一种以危害心脏和肝脏为主的病毒性疾病,肉雏鸡发病较多,成年鸡也可感染;垂直传播和水平传播是本病的主要传播方式;心包积水和包涵体肝炎是本病的视病特征。防治本病需要从诱因、病因和死因三方面入手,加强管理,做好消毒工作和对症治疗可有效防止本病的发生和蔓延;特异性抗体对本病的治疗有效,但仅限于疾病早期,对于发病中晚期的鸡群,建议直接淘汰。
关键词:鸡;安卡拉;心包积水;肝炎;防治
鸡安卡拉病是近年来养鸡业发生比较多的一种病毒性传染病,最早是在巴基斯坦安卡拉地区被发现,故得名“安卡拉病”,之后快速蔓延,对整个南亚和中亚地区国家造成严重影响,我国最近几年本病发生较多,且呈上升趋势,一度给很多养鸡场带来严重损失。笔者就本病的防治从以下几个方面和大家作一下交流。
1安卡拉病简介
安卡拉病毒归属于腺病毒,与单纯的包涵体肝炎病毒同源但不同血清型,对心脏和肝脏有较强的亲和力,常侵染2月龄之内的雏鸡,常见的白羽肉鸡、三黄鸡、817小型肉鸡、青脚麻鸡和黄脚麻鸡等肉鸡品种发病率较高,河北北部、河南、山东、安徽、陕南、江苏等地区多饲养上述品种,本病的报道较多,肉种鸡和蛋鸡也可发生本病。鸡群感染后大多在21 d左右开始出现死亡,28~35 d是死亡的高峰期,之后随着鸡群免疫力的增强,死亡率逐渐降低,病程为1~2周,死亡率在30%~70%之间。本病可经种蛋垂直传播,也可以通过密切接触水平方式传播。
2致病机理
安卡拉病毒的靶器官是心脏和肝脏,可导致上述两个器官的严重病变,又叫“心包积水-包涵体肝炎症”,鸡感染后,病毒随血流到达心脏部位,并黏附在心肌细胞上,将核酸遗传物质注入心肌细胞,在细胞核内通过与心肌细胞的遗传物质整合,利用机体的核苷酸原料大量复制出新的病毒,增殖的同时,免疫系统对其进行识别并发生免疫反应,造成细胞受损,心肌发炎,大量液体渗入心包,造成心包积水。积水的心包对心脏跳动造成严重影响,导致全身循环障碍,多器官组织缺氧。随着病情延长,心包中积水的水分被吸收,留下胶冻状的半固体物质,对心脏的扩张造成阻碍,加剧循环障碍,引发全身症状。
3临床症状
感染早期,由于心脏和肝脏仅为功能性病变,器官功能虽然下降,但由于正常细胞的代偿作用,可以维持整个机体循环和代谢需要,故看不出临床症状,随着病情进一步发展,心脏和肝脏出现器质性病变,病鸡可表现精神不振、两翅下垂、喜卧的症状,鸡可视黏膜发绀,鸡群活跃度降低,如不及时治疗,大多数鸡在出现症状后的48 h内死亡,病鸡如未及时隔离,则很快全群受到感染,传播迅速,传播期间,尽管鸡群整体看起来正常,但一直会有不明原因的突发死鸡。
4病理变化
对病死鸡剖检,可见心脏变大,心包积水,被一层胶冻样的物质包裹,颜色为黄色或淡黄色,肝脏肿大明显,表面有包涵体样坏死灶,质地不均一,中间肝体部位颜色深,边缘颜色发白。肾脏表面红白相间、肿大、出血,尿酸盐沉积严重。腺胃和肌胃交界处有明显弥漫性出血带,腺胃乳头也出血,胃黏膜变脆,肌胃中大量黄绿色的食糜残留,肺表现水肿,挤压有泡沫流出,并有纤维化特征,法氏囊肿大充血,肌肉可见条状或斑点状出血。另外,肝脏细胞受到损害后,细胞中的各种生化酶会释放入血液,尤其是氨基转移酶,血检会升高,同时,酯类物质的消化吸收也会出现障碍,病鸡消化不良,肠道中常见到消化不充分的饲料内容物。
5防治措施
防治本病需要从疾病的诱因、病因和死因三方面同时做工作。
5.1诱因
诱因是本病发生的诱发因素,鸡感染后可形成菌血症,如果无外界诱因作用,一般不发病或症状轻微,但当有诱因刺激时,本病可出现暴发,常见的诱因多为管理因素,如饲养环节出现惊群,滥用药物导致免疫力降低,饲料霉变导致霉菌毒素中毒,断水断料时间过长,饲养期间出现机体感染,鸡舍通风不良,饲养密度过大,早晚温湿度差异变化大等等,这些因素都会导致疫情的暴发,临床生产中需要加强管理来预防。
5.2病因
病因是鸡感染了安卡拉病毒,控制病因应做好日常消毒工作,坚持勤消毒、定期打扫鸡舍环境卫生和及时清粪,对于粪便污染的饲料和饮水,一定要及时更换,必要时,饮水中加入高锰酸钾配制成0.05%的溶液饮用,使病毒的传播几率降至最低。在引雏时,一定要从正规的病原检测阴性的非疫区种鸡场引入,从源头杜绝病原入场。
5.3死因
死因则是由病毒造成的心包积水和肝脏炎症,引发心功能下降,血液循环障碍,机体供氧不足而出现代谢水平低下,同时,肝脏的受损更是影响了食物的消化和毒素的代谢,造成死亡。针对死因可通过对症治疗来降低死亡率,如饮水中添加黄芪多糖口服液和电解多维以提升免疫力和增强鸡群的代谢水平与抗应激能力,减少发病。
5.4治疗
本病目前无特效药物,发生本病后,可在疾病早期注射特异性抗体阻止疾病发展,效果明显,但此病易复发,要加强管理,减少应激,提高免疫力。如果疾病发展至中晚期,抗体的疗效不理想,建议及时淘汰。
乙肝表面抗体滴度20有保护作用暂不用加强。可以在一年后考虑打加强针,抗体滴度接近于10左右时候加强注射就可以了。每个人对疫苗反应性不同,不能全追加乙肝疫苗,如果抗体明显升高属于强阳性说明疫苗成功,乙肝高危人群建议每年复查,如果抗体滴度下降,就追加乙肝疫苗。
正常人注射狂犬病免疫球蛋白并不会有什么危害。狂犬病免疫球蛋白是一种被动免疫制剂,主要用于狂犬病病毒高危暴露后预防狂犬病病毒感染。注射以后会在体内迅速出现抗狂犬病病毒感染的抗体,但是其持续的有效时间比较短,经过一段时间后就会完全消失。
免疫接种是根据特异性免疫的原理,采用人工方法给动物接种疫苗类毒素或免疫血清等生物制品,使机体产生对相应病原的抵抗力及主动免疫或被动免疫,也是使易感动物转化为非易感动物。以保护个体乃至群体而达到预防和控制疾病的目的。
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