双缩脲法的作用基团(双缩脲法的作用基团有哪些)

双缩脲法的作用基团有哪些

双缩脲反应是指具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应,生成红紫色的络合物.所有的蛋白质均有此显色反应.双缩脲试剂就是指能与具有两个以上肽键的化合物发生红紫色显色反应的试剂.它是NaOH和CuSO4两种溶液.在实验过程中,先在含蛋白质的溶液中加入等体积的NaOH溶液,混合均匀后,再滴几滴CuSO4溶液(量较少).即先后加入NaOH和CuSO4溶液.如果在NaOH中滴几滴CuSO4溶液混合后,再加入到含蛋白质的溶液中,混合液中就没有Cu2+,显色反应就不会发生.除-CONH-有此反应外，-CONH2-，-CH2-，NH2-，-CS-CS-NH2，等基团亦有此反应。

双缩脲法的作用基团有哪些不同

双缩脲试剂是 先加入NaoH溶液 营造一个碱性环境。

然后在加硫酸铜试剂。（碱性条件下硫酸铜能和蛋白质呈紫色） 菲林试剂是A液B液一块加入 水浴加热和还原性糖反应出现砖红色沉淀 现用现配

双缩脲的结构

只有含有两个以上的肽键，蛋白质或氨基酸衍生物才能与双缩脲反应，产生紫色络化物。

故选B。B不含肽键。抗生素不是蛋白质，各种抗生素的化学本质不一样，比如说青霉素，他的化学名是（2S，5R，6R）-3，3-二甲基-6-（2-苯乙酰氨基）-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-2-甲酸，又名苄青霉素，青霉素G（Penicillin G）。青霉素是从青霉菌培养液中提炼得到，天然的青霉素有7种，其中青霉素G含量最高，疗效最好。化学结构中母核是由氢化噻唑环与β-内酰胺环稠合而成。

双缩脲法的作用基团有哪些特点

双缩脲反应是肽和蛋白质所特有的，而为氨基酸所没有的一种颜色反应。一般分子中含有两个氨基甲酪基（即肽键：-CO-NH-）的化合物与碱性溶液作用，生成紫色或者蓝紫色的络合物。

铜水溶液功效，便会产生蓝紫色或紫蓝色络离子。

注：除-CO-NH-有此反映外，氟苯(-CONH2)、亚甲基(-CH2-)、亚氨基(-NH-)、(-CS-CS-NH2)等官能团亦有此反映。

因为蛋白质分子中带有许多与双缩脲构造类似的肽键，因而也可以与碘离子在碱性溶液中产生双缩脲反应，且色调浓淡与蛋白的成分的关联在一定范畴内合乎比尔基本定律，而与蛋白的碳水化合物构成及含量不相干，故能用双缩脲测定方法蛋白的成分(依靠光度计可减少偏差)。

什么结构能与双缩脲反应

双缩脲试剂就是指能与具有两个以上肽键的化合物发生红紫色显色反应的试剂。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲（H2NOC－NH－CONH2）结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应。蛋白质中的肽键与双缩脲中的一个结构相似，双缩脲试剂本是与这个结构反应。

何为双缩脲反应?有何应用意义

稀释蛋清的原因是若不稀释，蛋白液会与双缩脲试剂发生反应，从而会粘附在试管壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不容易刷洗干净。

双缩脲反应基团

蛋白质的呈色反应是依据肽键和R基上的一些特殊基团可与某些试剂作用产生颜色反应。

如在碱性溶液中，含两个以上肽键的化合物都能与硫酸铜反应生成紫色，称双缩脲反应；磷钨酸和磷钼酸能与蛋白质中色氨酸及酪氨酸残基反应生成蓝色化合物（钼蓝），称为酚试剂呈色反应。此两种反应常用于蛋白质定量。带苯基的蛋白质遇硝酸变黄属化学反应，因为蛋白质变性

双缩脲作用原理

首先还原糖用的是斐林试剂，它的反应原理是要产生CU（OH）2，使其与还原糖反应 双缩脲试剂是与蛋白质的，所以，蛋白质与双缩脲反应程紫色，但是双缩脲试剂是深蓝色，所以会影响结果！ 这个是我们高三参考书的答案。 所以二者不能互换，而且他们的配置时候的试剂浓度是不一样的！

简述双缩脲反应的原理

双缩脲法

用于鉴定蛋白质的分析方法

双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液，呈蓝色，由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋白质单位1-10mg。

基本信息

中文名

双缩脲法

外文名

Biuret method

成分

氢氧化钾、硫酸铜、酒石酸钾钠

名词解释

双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。

双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜，而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境，因此它可被其他碱，如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾，可延长试剂的使用寿命。

基本概况

实验原理

双缩脲（NH2CONHCONH2）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能够以一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。

紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。

此法的优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差，不适合微量蛋白的测定。

试剂与器材

1. 试剂：

1.

1. 试剂：

（1）标准蛋白质溶液：用标准的结晶牛血清清蛋白（BSA）或标准酪蛋白，配制成10mg/ml的标准蛋白溶液，可用BSA浓度1mg/ml的A280为0.66来校正其纯度。如有需要，标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，计算出其纯度，再根据其纯度，称量配制成标准蛋白质溶液。牛血清清蛋白用H2O 或0.9%NaCl配制，酪蛋白用0．05N NaOH配制。

（2）双缩脲试剂：称以1.50克硫酸铜（CuSO4·5H2O）和6.0克酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·4H2O），用500毫升水溶解，在搅拌下加入300毫升10% NaOH溶液，用水稀释到1升，贮存于塑料瓶中（或内壁涂以石蜡的瓶中）。此试剂可长期保存。若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。

2. 器材：

1.

2. 器材：

可见光分光光度计、大试管15支、旋涡混合器等。

操作方法

1.

标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。充分摇匀后，在室温（20~25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横坐标，光吸收值为纵坐标绘制标准曲线。

2、样品的测定：取2~3个试管，用上述同样的方法，测定未知样品的蛋白质浓度。注意样品浓度不要超过10mg/ml。

双缩脲法的特点

双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液；

双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液.

先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL，振荡均匀（营造碱性环境），再加入1～2滴双缩脲试剂B，振荡均匀。如果待测液里含有蛋白质，那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。

蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。