两者本质上是不同的东西,固相萃取柱是用来做固相萃取用的,主要作用是过滤和富集样品,而液相色谱柱是液相色谱上使用的,用来分析样品的。
液相微萃取(Liquid Phase Microextraction, LPME)技术是自1996年以来,随着环境分析技术的发展而发展起来的一种快速、精确、灵敏度高、环境友好的样品前处理技术。从广义上讲,该技术主要包括以下两个方面:(1)基于悬挂液滴的SDME(Suspended/Single Drop Microextraction)形式的微滴液相微萃取;(2)基于中空纤维的两相模式或三相模式的液-液微萃取或液-液-液微萃取。由于该方法具有操作简便、快捷、成本低廉、易与色谱系统联用等优点。
1 开机
1.1 打开计算机,输入用户名和密码,进入Windows画面。
1.2打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。待各模块自检完成后,双击“仪器1联机”图标,化学工作站自动与1260 LC通讯,进入工作站。
1.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,来调用所需的界面,正常情况会默认进入此界面。
2 数据采集方法、系列编辑:
2.1编辑完整方法:
2.1.1 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法” 项,选中除“数据分析 ”外的三项,单击“确定”,进入下一界面“方法注释”。
2.1.2 方法信息:
在“方法注释”中写入方法的相关信息。此项可忽略不写,单击“确定”,进入下一界面“选择进样源/位置”。
2.1.3 自动进样器参数设定:
选择“Als”的进样方式,单击“确定”,进入下一界面“设置方法”。
2.1.4 方法参数设定:
在“设置方法”界面选择“四元泵”选项,在“流量”处输入所需流量,如:1ml/min,在溶剂“B”、“C”、“D”处输入流动相所占比例(A=100-B-C-D),也可在右侧“时间表”项下选择“添加”,编辑梯度。在“停止时间”项下输入样品运行时间,在“压力限值”输入柱子的最大耐高压,如400bar,以保护柱子。
选择“进样器”选项输入进样体积。
选择“TCC” 选项,在左侧输入所需温度或选“不控制“,选中“和左侧相同”---使柱温箱的温度左右一致。
选择“DAD” 选项输入检测波长,一般选择最大吸收处的波长;该仪器能设八个波长。
以上各项编辑完后,单击“确定”,进入下一界面“运行时选项表”。
进入“运行时选项表”选中“数据采集”和“标准数据分析”,单击“确定”。
保存方法:
2.1.5 方法编辑完,在“方法” 菜单中选则“方法另存为”为新建方法命名,单击“确定”。
2.2 数据采集方法:
2.2.1 序列参数编辑:
在“序列”菜单中选择“序列参数”,在弹出对话框中输入操作者名称,数据存储目录路径中的子目录,子目录即为数据图谱存储的文件夹,请认真填写,输入后,鼠标点击其他处,会自动弹出“E:\---不存在,要创建它吗?”单击“确定”,再选择“手动”或“前缀/计数器”。
2.2.2 编辑序列表:
编辑序列表:在“序列”菜单中选择“序列表”,在“序列”菜单中选择“序列模板另存为”,为新建序列命名。
2.2.3 运行序列:
色谱柱安装完成后,在“仪器”菜单中选择“系统开启”或单击界面右侧绿色的“打开”快捷键,平衡色谱柱,等基线平稳,在“仪器”菜单中选择“运行序列”。
3 数据分析方法编辑:
3.1 打开“仪器1脱机”。从“视图”菜单中,单击“数据分析”进入数据分析界面。
3.2 从“文件”菜单选择“调用信号”,选中您的数据文件,单击“确定”。
3.3 做谱图优化,从“图形”菜单中选择“信号选项”选项,根据自身需要选择合适项。
3.4 积分。
3.5 打印报告并保存数据。
4 关机:
4.1 关机前,用95%水冲洗柱子和系统0.5-1小时,流量0.5~1ml/min,再用100%有机溶剂冲0.5小时,然后关泵,(适于反相色谱柱)。[正相色谱柱用适当的溶剂冲洗]
4.2 退出化学工作站,及其它窗口,关闭计算机。
4.3 关闭全部电源,稳压器等。
1、溶剂输送系统;储液器,用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器,以防止流动相中的颗粒进入泵内。脱气器,脱气的目的是为了防止流动相从色谱柱内流出时释放出气泡进入检测器,从而引起噪声,不能正常检测。
输液泵,将储液器中的流动相连续不断地以高压形式进入液路系统,使样品在色谱柱中完成分离过程。梯度洗脱装置,是在分离过程中通过逐渐改变流动相的组成增加洗脱能力的一种装置。
2、进样系统;进样器:是将样品送入色谱柱的装置,进样方式可以分为两种:阀进样或自动进样。比较常用的是采用自动进样器装样。
3、分离系统;色谱柱:对样品进行分离,是整个色谱系统的心脏,它的质量优劣直接影响到分离的效果。
4、检测系统;检测器:将色谱柱连续流出的样品组分转变成易于测量的电信号,被数据系统接收,得到样品分离的色谱图。
5、数据处理和记录系统;对色谱数据进行处理,并参与HPLC仪器的自动控制。
使用高效液相色谱时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,最后通过分析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。
高效液相色谱作为一种重要的分析方法,广泛的应用于化学和生化分析中。高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有本质的差别,它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相,适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。高效液相色谱使用粒径更细的固定相填充色谱柱,提高色谱柱的塔板数,以高压驱动流动相,使得经典液相色谱需要数日乃至数月完成的分离工作得以在几个小时甚至几十分钟内完成。
如果没有特殊说明,反向是可以用的,无论正反尽量避免来回调头使用,及时清洗柱子是防止柱压升高的关键
安捷伦液相色谱柱各种系列
ZORBAX Eclipse Plus 柱货号 (c18) 货号(c8) 产品名称 规格959990-902 959990-906 分析柱 250x 4.6mm,5 um959993-902 959993-906 分析柱 150x 4.6mm,5 um959996-902 959996-906 分析柱 100x 4.6mm,5 um959946-902 959946-906 分析柱 50x 4.6mm,5 um959701-902 959701-906 窄径柱 150x 2.1mm,5 um959746-902 959746-906 窄径柱 50x 2.1mm,5 um959763-902 959763-906 窄径柱 150x 2.1mm,3.5 um959793-902 959793-906 窄径柱 100x 2.1mm,3.5 um959743-902 959743-906 窄径柱 50x 2.1mm,3.5 um959733-902 959733-906 窄径柱 30x 2.1mm,3.5 um
Agilent ZORBAX StableBond SB-C3系列
产品货号 产品名称(对应USP L56) 规格880975-909 Agilent ZORBAX SB-C3液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um883975-909 Agilent ZORBAX SB-C3液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um883700-909 Agilent ZORBAX SB-C3液相窄径柱 150x 2.1mm,5 um820950-922 Agilent ZORBAX SB-C3保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX 300Extend-C18
产品货号 产品名称(对应USP L1) 规格770995-902 Agilent Zorbax 300ExtendC18液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um773995-902 Agilent Zorbax 300ExtendC18液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um763973-902 Agilent Zorbax 300ExtendC18液相色谱柱 50x 4.6mm,3.5 um761973-902 Agilent Zorbax 300ExtendC18液相色谱柱 100x 4.6mm,3.5 um761775-902 Agilent Zorbax 300ExtendC18液相色谱柱 100x 2.1mm,3.5 um820950-932 AAgilent ZORBAX 300Extend-C18保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX StableBond SB-C18
产品货号 产品名称(对应USP L1) 规格880975-902 Agilent ZORBAX SB-C18液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um883975-902 Agilent ZORBAX SB-C18液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um863953-902 Agilent ZORBAX SB-C18液相色谱柱 150x 4.6mm,3.5 um861953-902 Agilent ZORBAX SB-C18液相色谱柱 100x 4.6mm,3.5 um883700-902 Agilent ZORBAX SB-C18 液相窄径柱 150x 2.1mm,5 um830990-902 Agilent ZORBAX SB-C18液相窄径柱 150x 2.1mm,3.5 um861753-902 Agilent ZORBAX SB-C18液相窄径柱 100x 2.1mm,3.5 um820950-920 Agilent ZORBAX SB-C18保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX 300StableBond SB-C18
产品货号 产品名称(对应USP L1) 规格880995-902 Agilent ZORBAX 300StableBond SB-C18 液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um883995-902 Agilent ZORBAX 300StableBond SB-C18液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um863973-902 Agilent ZORBAX 300StableBond SB-C18液相色谱柱 150x 4.6mm,3.5 um883750-902 Agilent ZORBAX 300StableBond SB-C18液相色谱柱 150x 2.1mm,5 um820950-921 Agilent ZORBAX 300StableBond SB-C18保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX StableBond SB-CN系列
产品货号 产品名称(对应USP L10) 规格880975-905 Agilent ZORBAX SB-CN液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um883975-905 Agilent ZORBAX SB-CN液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um863953-905 Agilent ZORBAX SB-CN液相色谱柱 150x 4.6mm,3.5 um861953-905 Agilent ZORBAX SB-CN液相色谱柱 100x 4.6mm,3.5 um883700-905 Agilent ZORBAX SB-CN 液相窄径柱 150x 2.1mm,5 um861753-905 Agilent ZORBAX SB-CN液相窄径柱 100x 2.1mm,3.5 um820950-916 Agilent ZORBAX SB-CN保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX StableBond SB-C8系列
产品货号 产品名称(对应USP L7) 规格880975-906 Agilent ZORBAX SB-C8液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um883975-906 Agilent ZORBAX SB-C8液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um863953-906 Agilent ZORBAX SB-C8液相色谱柱 150x 4.6mm,3.5 um861953-906 Agilent ZORBAX SB-C8液相色谱柱 100x 4.6mm,3.5 um883700-906 Agilent ZORBAX SB-C8 液相窄径柱 150x 2.1mm,5 um830990-906 Agilent ZORBAX SB-C8 液相窄径柱 150x 2.1mm,3.5 um861753-906 Agilent ZORBAX SB-C8 液相窄径柱 100x 2.1mm,3.5 um820950-915 Agilent ZORBAX SB-C8保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX StableBond SB-Phenyl(苯基)
产品货号 产品名称(对应USP L11) 规格880975-912 Agilent ZORBAX SB-苯基液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um883975-912 Agilent ZORBAX SB-苯基液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um883700-912 Agilent ZORBAX SB-苯基液相窄径柱 150x 2.1mm,5 um820950-917 Agilent ZORBAX SB-苯基保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX StableBond SB-Aq色谱柱
产品货号 产品名称 规格880975-914 Agilent ZORBAX SB-Aq液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um883975-914 Agilent ZORBAX SB-Aq液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um830990-914 Agilent ZORBAX SB-Aq液相窄径柱 150x 2.1mm,3.5 um820950-933 Agilent ZORBAX SB-Aq保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX Extend-C18
产品货号 产品名称(对应USP L1) 规格770450-902 Agilent ZORBAX Extend-C18液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um773450-902 Agilent ZORBAX Extend-C18液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um763953-902 Agilent ZORBAX Extend-C18液相色谱柱 150x 4.6mm,3.5 um764953-902 Agilent ZORBAX Extend-C18液相色谱柱 100x 4.6mm,3.5 um773700-902 Agilent ZORBAX Extend-C18液相色谱柱 150x 2.1mm,5 um761753-902 Agilent ZORBAX Extend-C18液相色谱柱 100x 2.1mm,3.5 um820950-930 Agilent ZORBAX Extend-C18保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 /C8
货号 (C18) 货号(C8) 产品名称 规格959990-902 959990-906 ZORBAX Eclipse Plus C18 液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um959993-902 959993-906 ZORBAX Eclipse PlusC18 液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um959963-902 959963-906 ZORBAX Eclipse PlusC18 液相色谱柱 150x 4.6mm,3.5 um959961-902 959961-906 ZORBAX Eclipse PlusC18 液相色谱柱 100x 4.6mm,3.5 um959701-902 959701-906 ZORBAX Eclipse PlusC18 液相窄径柱 150x 2.1mm,5 um959763-902 959763-906 ZORBAX Eclipse PlusC18 液相窄径柱 150x 2.1mm,3.5 um959793-902 959793-906 ZORBAX Eclipse PlusC18 液相窄径柱 100x 2.1mm,3.5 um820950-936 820950-937 ZORBAX Eclipse Plus保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um821125-936 821125-937 ZORBAX Eclipse Plus保护柱芯,4/包 12.5x 2.1mm,5um
Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18
产品货号 产品名称(对应USP L1) 规格990967-902 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um993967-902 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um963967-902 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18液相色谱柱 150x 4.6mm,3.5 um961967-902 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18液相色谱柱 100x 4.6mm,3.5 um993700-902 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 液相窄径柱 150x 2.1mm,5 um930990-902 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18液相窄径柱 150x 2.1mm,3.5 um961753-902 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18液相窄径柱 100x 2.1mm,3.5 um820950-925 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX Eclipse XDB-CN
产品货号 产品名称(对应USP L10) 规格990967-905 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-CN液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um993967-905 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-CN液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um963967-905 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-CN液相色谱柱 150x 4.6mm,3.5 um961967-905 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-CN液相色谱柱 100x 4.6mm,3.5 um993700-905 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8N液相窄径柱 150x 2.1mm,5 um820950-935 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-CN保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8
产品货号 产品名称(对应USP L7) 规格990967-906 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um993967-906 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um963967-906 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8液相色谱柱 150x 4.6mm,3.5 um961967-906 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8液相色谱柱 100x 4.6mm,3.5 um993700-906 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8 液相窄径柱 150x 2.1mm,5 um820950-926 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
Agilent ZORBAX Eclipse XDB-苯基液相色谱柱
产品货号 产品名称(对应USP L11) 规格990967-912 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-苯基液相色谱柱 250x 4.6mm,5 um993967-912 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-苯基液相色谱柱 150x 4.6mm,5 um963967-912 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-苯基液相色谱柱 150x 4.6mm,3.5 um993700-912 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-苯基液相窄径柱 150x 2.1mm,5 um820950-927 Agilent ZORBAX Eclipse XDB-苯基保护柱芯,4/包 12.5x 4.6mm,5um
一、色谱柱固有属性
柱长,柱经,粒径是柱子的固有属性,柱效取决于填料种类。
在填料种类相同的情况下,柱效与柱长成正比,与粒径成反比,柱效与柱长和粒径的比值有关,比值越大柱效越高。
二、色谱柱分析属性
流速,柱压,分离度,分析时间,柱容量与进样体积,是柱子的分析属性。容量因子与洗脱强度决定柱子与分析参数。柱子在最优的条件下达到最佳柱效。
1、最佳流速——只与柱径有关,柱径越大,最佳流速越大,消耗的溶剂越多。
2、最佳柱压——对于给定的色谱柱,最佳流速下的柱压就是最佳柱压,柱压的大小与流动相的种类黏度和配比有关,也与色谱柱柱温有关。
柱压与流速成正比,与柱效成正比,与流动相黏度成正比,与柱温成反比。
3、最佳分离度——分离度与柱长成正比,与柱效成正比,与粒径成反比。
4、分析时间——分析时间与柱长成正比,柱子越短,分析时间越短,反之越长。
5、柱容量与进样体积——柱容量只与柱经和柱长有关,柱子体积越小,柱容量越小;进样体积与柱容量成正比,柱容量越小,消耗样品越少。
6、容量因子与洗脱强度——洗脱强度越大,容量因子越小,保留越弱,出峰越早;洗脱强度越小,容量因子越大,保留越强,出峰越晚。
其实超高效液相色谱仪就是利用了色谱柱的固有属性和分析属性。超高效液相色谱,使用小颗粒短柱,提高柱效,降低柱压,缩短分析时间,降低溶剂消耗,减小样品损失,提高分析效率,降低分析成本。
离子色谱主要用于环境样品的分析,包括地面水、饮用水、雨水、生活污水和工业废水、酸沉降物和大气颗粒物等样品中的阴、阳离子,与微电子工业有关的水和试剂中痕量杂质的分析。离子色谱是高效液相色谱的一种,故又称高效离子色谱(HPIC)或现代离子色谱,其有别于传统离子交换色谱柱色谱的主要是树脂具有很高的交联度和较低的交换容量,进样体积很小,用柱塞泵输送淋洗液通常对淋出液进行在线自动连续电导检测。离子色谱仪的工作过程输液泵将流动相以稳定的流速( 或压力) 输送至分析体系,,在色谱柱之前通过进样器将样品导入, 流动相将样品带入色谱柱, 在色谱柱中各组分被分离, 并依次随流动相流至检测器, 抑制型离子色谱则在电导检测器之前增加一个抑制系统。
即用另一个高压输液泵将再生液输送到抑制器, 在抑制器中, 流动相的背景电导被降低。
然后将流出物导入电导检测池。检测到的信号送至数据系统记录、处理或保存。
非抑制型离子色谱仪不用抑制器和输送再生液的高压泵。因此仪器的结构相对要简单得多, 价格也要便宜很多。
APSH-6000高效液相色谱仪与超高效液相色谱仪的区别
超高效液相色谱仪的原理与APSH-6000高效液相色谱仪基本相同,所改变的地方有以下几点:
小颗粒、高性能微粒固定相的出现。APSH-6000高效液相色谱的色谱柱,例如常见的十八烷基硅胶键合柱,它的粒径是5um,而超高效液相色谱的色谱柱,会达到3.5um,甚至1.7um。这样的孔径更加利于物质分离
(2)超高压输液泵的使用。
由于使用的色谱柱粒径减小,使用时所产生的压力也自然成倍增大。故液相色谱的输液泵也相应改变成超高压的输液泵。
(3)高速采样速度的灵敏检测器。
(4)使用低扩散、低交叉污染自动进样器。配备了针内进样探头和压力辅助进样技术;
(5)仪器整体系统优化设计。色谱工作站配备了多种软件平台,实现超高效液相分析方法与高效液相分析方法的自动转换。
与传统的HPLC相比,UPLC的速度、灵敏度及分离度分别是HPLC的9倍、3倍及1.7倍,它缩短了分析时间,同时减少了溶剂用量降低了分析成本。
不过由于实验过程中仪器内部压力过大,也会产生相对应的问题。例如泵的使用寿命会相对降低,仪器的连接部位老化速度加快,包括单向阀等部位零件容易出现问题等。
保护柱选择考虑以下几方面因素:
1. 除非特殊情况,一般选择填料基质与分析柱基质完全相同的保护柱。
2. 选择保护柱尺寸可按柱体积计算,保护柱体积按分析柱体积的5%~10%即可;如4.6*250mm的分析柱体积约为4mL,保护柱体积可选择在0.2~0.4mL之间为宜。同时,保护柱内径应与分析柱内径相同或相当。
高效液相色谱法,只要求试样能制成溶液,而不需要气化,因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400 以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的75% ~80% )原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计,在已知化合物中,能用气相色谱分析的约占20% ,而能用液相色谱分析的约占70~80%.
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC )又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
植物提取物百科 全球最大的植物提取物中文网 stephenture@qq.com
Copyright © 2020-2024 zwwiki.Cn All Rights Reserved