浓缩胶的作用原理(浓缩胶浓缩效应的原理)

浓缩胶浓缩效应的原理

因为上层浓缩胶主要是要把蛋白质浓缩了，所以PH值是6.8。而下层浓缩胶是为了分散蛋白质，所以PH值是8.8

浓缩胶的作用原理是什么

带电荷的蛋白质 或核酸离子在大孔径胶中移动时阻力小，移动速度快，当接近小孔径的分离胶时，遇到的阻力大，移动速度减慢而使样品浓缩，形 成一条狭窄区带，以减少电泳过程中的谱 带扩散。

浓缩胶浓缩原理

浓缩胶里完成完全SDS化、以及把一些大的离谱的东西去掉分离胶就分离。。。

浓缩胶的作用原理图

促凝剂是一种用于建筑砂浆、建筑混凝土中的添加剂，也可作为石油、天然气开采加工助剂。特别适合用于水泥制品的下水管、隔热层，水泥预制件及水泥道路修补等要求快速凝固和加快模具利用周转的项目。

分离胶指不连续缓冲体系聚丙烯酰胺凝胶电泳中的一部分，其组成、缓冲液pH和凝胶孔径与浓缩胶均不 同，具有分子筛效应的小孔径凝胶。蛋白质 或核酸在电泳过程中由浓缩胶进入分离胶，由于分子筛作用，小分子的物质容易通过，阻力小，迁移速度快；大分子的则受到较大 的阻力而被滞后。因此即使净电荷相似、泳 动率相等的物质分子也会由于分子筛效应，根据其各自分子量的大小而在分离胶中被分 开。

浓缩胶的作用原理 知乎

通过较高的ph值使蛋白质在胶中的移动速度缓慢，导致蛋白质不能够分离。使所有蛋白质都在浓缩在一起。

浓缩胶浓缩蛋白质的原理

配胶时，建议浓缩胶室温凝固20-30分钟后，再加分离胶，室温凝固2-3小时后再用效果佳，如果当天配完不用，需塑料薄膜手套之类的将其包好，放置 4°冰箱过夜，第二天即用，不建议时间过长使用

半小时到40分钟左右

半小时到40分钟左右,天凉时间会长一些,也取决于TEMED等,提前配好胶到时再用也是可以的。

浓缩胶的目的

一般我们采用1mm厚的玻璃板制胶，将玻板固定好确认其密封，配制分离胶（也叫下层胶）约5ml，缓缓注入玻板中，然后覆盖一水层，室温静置15～20min待胶凝固；去除水层，配制浓缩胶（也叫上层胶）约2ml，最后插上1mm的梳子，室温静置20min左右。在这里值得注意的是，分离胶浓度的选择与蛋白分子量大小、目的蛋白分子量等因素密切相关。同一条件下，胶浓度越高，所需电泳时间越长。蛋白分子量小的蛋白，通常胶浓度选大一些，反之亦然。如果实验之前无法准确判断胶浓度如何选择，可以先用10％或12％的胶先做一次预实验，后续再根据实际情况优化实验条件。

配制15ml 5%的分离胶：30% Acr-Bis (29:1)-2.5ml；H2O-8.4ml；1.5M Tris-HCl（ pH8.8）-3.8ml；10%SDS-150ul；10%过硫酸铵-150ul；TMED-8-15ul

浓缩胶一般是5％的浓度，不做其他浓度的调试。

浓缩胶和分离胶的原理

分离胶指不连续缓冲体系聚丙烯酰胺凝胶电泳中的一部分，其组成、缓冲液pH和凝胶孔径与浓缩胶均不 同，具有分子筛效应的小孔径凝胶。蛋白质 或核酸在电泳过程中由浓缩胶进入分离胶，由于分子筛作用，小分子的物质容易通过，阻力小，迁移速度快；大分子的则受到较大 的阻力而被滞后。因此即使净电荷相似、泳 动率相等的物质分子也会由于分子筛效应，根据其各自分子量的大小而在分离胶中被分 开。

很显然，分离胶材料需要冷藏。