DTT和TCEP(DTT是什么)

DTT和TCEP

一年，TCEP是一种非常有效的硫醇类还原剂，广泛用作“蛋白质”化学及蛋白质组学研究中二硫键的定量还原剂。该试剂在水溶液中的稳定性和溶解性都很好。在酸性、碱性溶液中的稳定性也不错。

与其他类别的硫醇类还原剂如DTT相比，TCEP不仅是一种高效的二硫键还原剂，而且在某些巯基的交联反应中不需要除掉。因而在蛋白质化学及蛋白质组学研究常常优先选择TCEP。

DTT是什么

DTT 的英文全称是“Discrete Trial Teaching”，中文可译为“回合式操作教学法”或“分解式操作教学法”。DTT应用行为分析法（Applied Behavior Analysis, ABA）的具体教学操作方法。

DTT是一个非常具体，非常系统的教学方法，越来越多的孤独症康复训练都使用这个教学方法。

dtt全称

四大会计师事务所，分别是：普华永道（PwC）、德勤（DTT）、毕马威（KPMG）和安永（EY），这四家会计师事务所在全球各地设立了专业服务机构，专门为企业提供审计、税务和咨询等工作。

DTT用途

dtt是二硫苏糖醇，是一种小分子有机还原剂，全英文是Dithiothreitol，简称为DTT，化学式为C4H10O2S2，又被称为1,4-二硫苏糖醇、二硫代苏糖醇、Cleland试剂。

DTT的还原性非常强，但是容易被空气氧化，所以稳定性比较差。其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。DTT的还原力受pH值的影响，只在pH值大于7的情况下能够发挥还原作用。这是因为只有脱去质子的硫醇盐负离子(-S–)才具有反应活性，硫醇(-SH)则没有;而巯基的pKa一般为～8.3。

DTT的特点

指令是主体对客体发出的一个刺激，通俗的讲即是当你要求别人做什么事时所要说的话。是ABA中DTT操作的第一要素。

DTT技术

四大会计师事务所指世界上著名的四间会计师事务所：普华永道(pwc)、德勤(dtt)、毕马威(kpmg)、和安永(ey)

会计师事务所（accountingfirms）是指依法独立承担注册会计师业务的中介服务机构。是由有一定会计专业水平、经考核取得证书的会计师（如中国的注册会计师、美国的执业会计师、英国的特许会计师、日本的公认会计士等）组成的、受当事人委托承办有关审计、会计、咨询、税务等方面业务的组织。中国对从事证券相关业务的会计师事务所和注册会计师实行许可证管理制度。

会计师事务所的业务从过去的审计、代申报税金、公司登记、股票管理、公证、诉讼代理人、遗嘱执行人、破产清算人等，发展到全面提供经济管理和技术管理的咨询服务，业务内容已大大超出会计范围。其中，一些较大的国际性合伙公司在中国已设立了常驻代表处或派驻了常驻代表。

蛋白里加dtt的作用

蛋白质的复性蛋白质复性的最大问题，是在复性过程中形成中间体和多聚体，中间体阻碍作用大的使蛋白质正确折叠困难，复性就困难；阻碍小或无阻碍的容易复性。降低蛋白浓度可以减少中间体形成提高复性率。减少中间体的形成，可选用添加小分子物质，又叫分子伴侣，如精氨酸、甘油、PEG等小分子物质帮助蛋白质正确折叠。

避免多聚体的形成可以加入氧化还原剂（DTT、ß－ME、还原型谷胱甘肽、氧化型谷胱甘肽、Cu2＋等），帮助蛋白质复性中二硫键的正确配对，减少错配率。复性缓冲液的pH要远离等电点，离子强度不易过高，10－50mmol/L，离子强度太高蛋白质易发生沉淀，也不利于离子交换层析的分离；复性液温度不易过高在4℃－10℃较合适对于耐热蛋白也可以室温复性。复性时间，以天然表达的重组蛋白复性应在6hr以上，需要进行酶切的融和表达重组蛋白，至少要复性1hr以上，方可进行进一步的酶切

DTT的作用

二硫键（disulfide bond） 是连接不同肽链或同一肽链中，两个不同半胱氨酸残基的巯基的化学键。二硫键是比较稳定的共价键，在蛋白质分子中，起着稳定肽链空间结构的作用。二硫键数目越多，蛋白质分子对抗外界因素影响的稳定性就愈大。

二硫键与蛋白质高级结构的生物活性有关，同时与蛋白质的复性也有关联。如核糖核酸酶A经巯基乙醇（还原剂）和尿素（蛋白质变性剂）处理后，发生变性作用，4对二硫键断裂，多肽链伸展开来，高级结构发生变化，失去生物活性。如果用透析法将大量还原剂和变性剂除去，在微量还原剂存在下，4对二硫键在原来的位置重新形成，伸展开的多肽肽链会自发折叠成天然构象，生物活性得到恢复。此试验也证明蛋白质高级结构的信息存在于一级结构中