病理科细胞制片室的作用(细胞学制片最常用的方法)
细胞学制片最常用的方法
需要护士的。
病理科是临床的辅助科室,负责的是作出病理诊断,出具病理报告。
病理科有巨检室、标本室、阅片室、免疫组化室、细胞学室等等,完成
(1)活体组织病理诊断;
(2)冰冻切片病理诊断;
(3)脱落细胞学病理诊断;
(4)穿刺细胞学病理诊断;
(5)免疫组织化学病理诊断。
标本的采集,巨检,最后的诊断都是由病理科医师干的,病理科护士也就是干些辅助的捞片,涂片、染色、制片、最后打印病理报告之类的事情。
细胞学传统制片方法
液基薄层细胞制片术是一种比较先进的细胞学的检查,是病理学检查的一种,是指薄层制片自动装置制备细胞学标本。
薄层制片自动装置就如同病理组织切片机一样,只是制片的机器,这个装置在恒定的面积上均匀分布着很薄的一层细胞,克服了传统制片技术存在的材料太厚、细胞重叠、背景模糊和染色不佳等等这些问题。当然近年来也陆陆续续出现了国产的液基薄层细胞制片装置,随着液基薄层细胞制片技术的推广,也出现了多种人工或者半自动的液基制片的办法。
总之,是一个比较先进的细胞学的检查,当然这个细胞学的检查可以诊断各种疾病。
什么是细胞学切片
人体解剖基础知识,大一的学姐给大家总结归纳了下面的知识点,包括人体解剖学重点必考名词解释和人体解剖学重点必考试题
1、器官:几种不同组织合成具有一定形态、功能的结构。
2、系统:形态不同、共同完成一种连续的功能的器官组合在一起称为系统
3、内脏:呼吸、消化、泌尿和生殖系统的大部分器官位于胸、腹、盆腔内,并借孔道与外界相通,统称为内脏
4、解剖学姿势:身体直立,两眼平视前方,上肢下垂,掌心向前,下肢并拢,足尖向前
5、椎孔:椎体与椎弓构成椎孔,所有椎孔连成椎管,内容纳脊髓
6、椎间孔:相邻两椎弓根的上、下切迹围成椎间孔,椎间孔内有脊神经通过。
7、骶角:骶管裂孔两侧向下的突起,称骶角。是骶管麻醉的定位标志
8、界线:由骶骨岬、弓状线、耻骨梳、耻骨结节、耻骨联合上缘围成,是大、小骨盆的分界线。
9、椎间盘:位于相邻两推体之间,由周围的纤维环和中央的髓核构成,后外侧纤维环薄弱,易引起椎间盘突出
10、胸廓:由12块胸椎、12对肋、1块胸骨借骨连接 连接而成,具有参与呼吸运动,保护胸腹腔器官的功能
11、胸骨角:胸骨柄与胸骨体连接处形成向前微凸的角称胸骨角,两侧与第二肋软骨相连,是计数肋骨序数的标志。
12、胸骨下角:两侧肋弓之间的夹角称胸骨下角,内有剑突
13、肋弓:第8~10对肋软骨的前端依次连于上位肋软骨下缘形成肋弓
14、翼点:位于颅侧面的颞窝内,是额、顶、颞、蝶四骨之间相交的区域,此处骨质薄弱,内有脑膜中动脉通过,骨折时易损伤该动脉,引起颅内血肿
15、前囟:位于颅顶矢状缝前端充填的纤维组织膜,呈菱形,新生儿多于生后1岁半闭合。
16、鼻旁窦:位于同名颅骨内,并开口于鼻腔的含气空腔,由骨性鼻旁窦内衬黏膜构成;包括上颌窦、蝶窦、筛窦、额窦各一对17、桡神经沟:肱骨中段的后上方 从内上 斜向 外下 的浅沟 称桡神经沟,内有桡神经通过
18、尺神经沟:肱骨内上髁后方的浅沟,内有尺神经经过
19、肘后三角:肱骨内、外上髁和尺骨鹰嘴在伸肘180°时呈一直线,当肘关节前屈90°时呈一等腰三角形,这种位置关系发生改变,提示有肘关节脱位
20、耻骨下角:两侧耻骨下支、坐骨支和耻骨联合下缘所成的夹角称耻骨下角
21、足号:跗骨和跖骨借骨连接而形成凸向上的弓形结构称为足弓,具有缓冲震荡,保护脑和内脏器官等作用
22、腹般沟韧带:腹外斜肌膜下缘增厚,连于髂前上棘和耻骨结节之间形。
23、腹股沟管:腹股沟韧带内侧 半上方的一条斜行肌腱裂隙,内有男性精索或女性子宫圆韧带通过。
24、骶管裂孔:骶骨内的骶管,上端与椎管相连,下端开口呈三角形,称骶管裂孔
25、股三角:位于股前面上部,由腹股沟韧带、长收肌、缝匠肌围成,内有股静脉、股动脉、股神经。
26、上消化道:口腔到十二指肠之间的消化道称上消化道
27、下消化道:空肠至肛门的消化管称下消化道。
28、咽峡:由腭垂、两侧的腭舌弓和舌根共同围成,是口腔和咽的分界线。
29、十二指肠悬韧带:固定十二指肠与空肠相连处的结缔组织称十二指肠悬初带,是空肠起始端的标志,也是上、下消化道的分界线
30、回盲瓣:回肠突入盲肠的肠管称回盲瓣,既可限制回肠内容物进入盲肠的速度,又可以阻止大肠内容物返流小肠的作用。31、麦氏点:阑尾根部的体表投影,位于脐与右髂前上棘连线的中、外1/3交点处,是急性阑尾炎的压痛点。
32、齿状线:由肛柱的下端和肛瓣边缘共同围成的锯齿状的环行线,它是黏膜与皮肤的分界线,也是是内、外痔的分界标志
33、肝门:肝的脏面有一“H"型沟,其横沟称肝门:是肝左右管、肝固有动脉、肝门静脉、淋巴管和神经出入的部位
34、肝胰壶腹:胰管与胆总管汇合成肝胰壶腹,共同开口于十二指肠大乳头
35、腹膜腔:壁腹膜和脏腹膜相互移行围成的潜在间隙称腹膜腔:男性是密闭的,女性可经输卵管腹腔口、输卵管、子宫和阴道与外界相通。
36、直肠子宫凹陷:是直肠与子宫之间较大而恒定的凹陷,为女性腹膜腔的最低点。37、上呼吸道:临床上将鼻、咽、喉称为上呼吸道
38、蝶筛隐窝:在上鼻甲的后上方与鼻腔顶壁间的凹陷称蝶筛隐窝,是蝶窦的开口部位。
39、声门裂:两侧声襞之间的裂隙称声门裂,是喉腔最狭窄的部位。
40、喉室:前庭襞和声襞之间的部分,向两侧延伸为喉室;喉室产生润滑液,润滑声带41、肺门:肺内侧面近中央处有一长椭圆形凹陷,称肺门,是主支气管、血管、淋巴管和神经出入肺的部位
42、肺根:出入肺门的结构被结缔组织包绕在一起称肺根
43、心切迹:左肺前缘下份有一明显弧形回陷称心切迹,由心脏压追左肺形成
44、声门下腔:声门裂平面以下的部分;其组织结构硫松,炎症时易水肿,引起窒息45、胸膜腔:脏壁两层胸膜在肺根处相互移行形成的密闭腔隙称胸膜腔
46、肋膈隐窝:肋胸膜与膈胸膜转折处形成较深的半环形间隙称肋膈隐窝,是胸膜腔的最低点
47、纵隔:是两侧纵隔胸膜之间所有组织和器官的总称
48、肾门:肾内侧缘中部凹陷称为肾门,是肾动脉、肾静脉、肾盂、神经和淋巴管出入肾的部位
49、肾区:位于竖脊肌的外侧缘与第12肋的夹角处,肾病变时该处有叩击痛
50、肾窦:肾门向内凹陷形成的腔隙称肾窦,容纳肾大小盏、肾孟、肾血管和脂防组织
51、肾柱:肾皮质伸入肾髓质的部分称肾柱52、肾缔:出入肾门的结构被结缔组织包绕,称为肾蒂;左侧肾蒂较长
53、肾乳头:位于肾髓质,即肾锥体的尖端部分,外形圆纯,朝向肾窦
54、脂肪囊:脂肪囊为包被在纤维囊外周的囊状脂肪层,是肾囊封闭药物注射的部位55、膀胱三角:在膀胱底的内面,两输尿管口与尿道内口之间的三角区域,此处黏膜无论膀胱充盈或空虚时均光滑无皱襞,是肿瘤和结核的好发部位。
56、精索:从睾丸上端至腹股沟管深环一段柔软的圆索状结构,内有输精管、睾丸动脉、蔓状静脉丛、淋巴管和神经等
57、前尿道:男性的前尿道是指尿道穿过海绵体的部分
58、睾丸鞘膜腔:鞘膜脏、壁 两层在睾丸后缘相互移行围成密闭的腔隙称睾丸鞘膜腔59、子宫峡:子宫颈阴道上部,子宫颈与子宫体相接部分稍窄细称子宫峡,是产科剖宫取胎处
60、阴道穹:阴道上端与子宫颈阴道部分之间形成的的环状间隙称阴道穹
61、会阴:指封闭骨盆下口的所有软组织,呈菱形,有尿道、直肠及女性阴道等通过62、狭义会阴:肛门与外生殖器之间的软组织,又称产科会阴
63、动脉:输送血液离心的血管称动脉
64、卵圆窝:指在右心房的后内侧壁(或房间隔)下部的卵圆形凹陷,是房间隔缺损的好发部位
65、动脉韧带:在肺动脉干 分叉处 稍左侧与主动脉弓下缘有一结缔组织索 称动脉韧带,是胚胎时期动脉导管闭锁后的遗迹66、体循环:循环于左心室与右心房之间的血液循环,又称大循环
67、上腔静脉:由左右头臂静脉汇合而成,下行注入右心房。
68、窦房结:呈长椭圆形,位于上腔静脉与右心房 交界处 心外膜的深面,是心的正常起搏点。
69、肝门静脉:由肠系膜上静脉和脾静脉 在胰头的后方汇合而成,收集腹腔内除肝和直肠下端外 所有不成对器官的静脉血
70、静脉角:同侧颈内静脉和锁骨下静脉汇合处形成的夹角称静脉角,有淋巴导管注入71、危险三角:面部两侧口角至鼻根的三角区城称危险三角:此处静脉无静脉瓣,该区炎症如处理不当,可逆行向上引起颅内感染72、胸导管:起位于第1腰椎前面的乳糜池,向上穿主动脉裂孔入胸腔,注入左静脉角。
73、乳糜池:胸导管起始部的囊状膨大,由左、右腰干和肠干汇合而成,位于第1腰推的前方
74、巩膜静脉窦:巩膜与角膜交界处深部有一环形小管称巩膜静脉窦,房水由此汇入眼静脉。
75、视神经盘:又称视神经乳头,是视网膜后部中央偏鼻侧处的白色圆盘状的结构,无感光能力称为生理性盲点
76、螺旋器:是听觉感受器,位于蜗管的基底膜上,能接受声波的刺激
77、黄斑:距 视神经盘 颞侧约3.5mm处 的黄色圆形小区 称黄斑:其中央略凹陷称中央凹,是感光、辨色最敏锐的部位
78、壶腹脊:膜壶腹内的突起 称壶腹崤,能感受旋转变速运动的刺激
79、咽鼓管:又称欧氏管,是沟通 鼓室与鼻咽部 的通道,可保持 鼓室内外 的气压平衡。
80、灰质:在中枢神经系统内,神经元 胞体和树突 聚集的部位,分布于大、小脑 表面的灰质 称皮质
81、白质:在中枢神经系统内,神经纤维聚集的部位,分布于大、小脑的白质 称髓质。82、神经核:在中枢神经系统内,功能相似的神经元胞体聚集成的 团块状或柱状 结构83、神经节:在周围神经系统内,形态和功能相同的神经元胞体聚集而成的 结节状 结构
84、纤维束:在中枢神经系统内,起止、行程和功能基本相同的神经纤维聚集成束。85、神经:在周围神经系统内,成束的神经纤维 被结缔组织 包绕形成的条索状结构86、脊髓圆锥:脊髓末端变细呈圆锥状,称为脊髓圆锥,成人脊髓圆锥下端平对第一腰椎下缘
87、小脑扁桃体:小脑半球下面,近枕骨大孔处的部分 较隆突 称小脑扁桃体
88、第四脑室:位于延髓、脑桥和小脑之间的室腔,内有脑脊液
89、基底核:包埋在 大脑髓质内 的灰质团块,包括豆状核、尾状核和杏仁体
90、内囊:位于尾状核、背侧丘脑和豆状核之间的投射纤维,在大脑水平切面 为一宽厚的白质层,呈“><“形
91、硬膜外隙:硬脊膜与椎管内 骨膜 之间的狭窄腔隙,是硬膜外麻醉的部位
92、硬脑膜窦:硬脑膜某些部分 两层分开 形成的含 静脉血的腔隙 称硬脑膜窦
93、蛛网膜下隙:蛛网膜与软膜之间的腔隙,充满脑脊液
94、大脑动脉环:由两侧大脑 前动脉、前交通动脉、颈内动脉、后交通动脉及大脑后动脉 吻合而成,围绕在视交叉、灰结节和乳头体 的周围
95、脉络丛:在脑室附近,由软脑膜、毛细血管和室管膜上皮 共同突入脑室内 构成脉络丛,产生脑脊液
97、视交又:是由双眼视网鼻侧半交叉纤维和双眼视网膜顾侧半不交叉纤锥所共同学96、交感干:位于脊柱两侧,节与节之间 借 节间支 相连 构成串珠状的 神经节链,称为交感干
98、锥体系:指由大脑皮层发出 并经延髓锥体 抵达对侧 脊前角的皮质脊髓束 和抵达 脑神经运动核的皮质核束
细胞学制片最常用的方法有
宫颈癌筛查是对宫颈做一些化验检查,通过液基薄层细胞试剂盒采集宫颈口的脱落细胞,使用全自动薄层细胞制片机制片,并根据细胞核形态进行细胞学诊断是否具有癌变症状,是否有宫颈病变的情况,它可及时发现宫颈疾病,如宫颈炎症或者是阴道炎症,以便得到及时治疗。
细胞学和组织学制片的先决条件是
相同的。
TCT检查是查验宫颈是否癌变的检查项目之一,就是宫颈薄层液基细胞学检测技术的简称,是通过对宫颈口脱落细胞进行分类诊断,判断细胞是否癌变,通过这一技术还能发现是否存在癌前病变、微生物感染等现象。
在医院采样后机器上可以打印纸质报告,手机上可以接收电子报告。
细胞学制片最常用的方法是什么
1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液
A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精 毫升
B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水 100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液
A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精 10.O 毫升
B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水 95 毫升
将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)
A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精 25.0 毫升
B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水 100 毫升
将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用):碘 1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水 300毫升
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克 蒸馏水 100毫升
6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水 100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水 100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液 :刚果红(Congo red) 2.0 克蒸馏水100ml
9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水 95.0
10、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸 10.0克 甘油 20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升 棉蓝 0.02克蒸馏水 10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
11动物组织石蜡切片染色方法
苏木精-伊红(HE)染色:二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min,依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min,蒸馏水洗;入苏木精染液10 min,盐酸酒精分色4 s,自来水洗10 min;依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min,入伊红染液染色10 min;入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明,中性树脂封片.
一、常用染色液的配制
⒈ 碘-碘化钾(I2-KI)溶液 能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测定的重要试剂。
配方:碘化钾2g ; 蒸馏水300ml ; 碘1g
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍,这样染色不致过深,效果更佳。
⒉. 苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ) 能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色,是著名的脂肪染色剂。
配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ; 95%酒精10ml ; 过滤后再加入10ml甘油
(2)先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。
(3)苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。
⒊. 1%醋酸洋红(aceto carmine): 酸性染料,适用于压碎涂抹制片,能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。
配方:洋红1g ; 45%醋酸100ml
煮沸2h左右,并随时注意补充加入蒸馏水到原含量,然后冷却过滤,加入4%铁明矾溶液1~2滴(不能多加,否则会发生沉淀),放入棕色瓶中备用。
⒋ 改良苯芬品红染色液(Carbol fuchsine): 核染色剂。
配制步骤: 先配成三种原液,再配成染色液。
原液A:3g碱性品红溶于100ml 70%酒精中。
原液B:取原液A10ml加入到90ml 5%石炭酸水溶液中。
原液C:取原液B 55ml,加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林(38%的甲醛)。
(原液A和原液C可长期保存,原液B限两周内使用)
染色液:取C液10~20ml,加45%冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1~1.8g,配成10%~20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后使用,效果显著(若立即用,则着色能力差)。
适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法,染色体着色深,保存性好,使用2~3年不变质。山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨醇也能染色,但效果较差。[/sell]
⒌ 中性红(neutral red)溶液 :用于染细胞中的液泡,可鉴定细胞死活。
配方:中性红0.1g ; 蒸馏水100ml
使用时再稀释10倍左右。
⒍ 曙红Y(伊红,eosin Y)酒精溶液 常与苏木精对染,能使细胞质染成浅红色,起衬染作用。
配方:曙红0.25g ; 95%酒清100ml
也常用于95%酒精脱水时,加入少量曙红溶液,其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识别材料。
⒎ 钌红(ruthenium red)染液 钌红是细胞胞间层专性染料,其配后不易保存,应现用现配。
配方:钌红5~10mg ; 蒸馏水25-50ml
⒏ 龙胆紫(gentian violet) 为酸性染料,适用于细菌涂抹制片。
配方:龙胆紫0.2~1 g ; 蒸馏水100ml
⒐ 苯胺兰(aniline blue)溶液 :为酸性染料,对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等,尤其是染丝状藻类效果好。还多用于与真曙红作双重染色,对于高等植物多用于与番红作双重染色。
配方:苯胺兰1 g ; 35%或95%酒精100ml
⒑ 间苯三酚(phloroglucin)溶液 用于测定木质素。
配方:间苯三酚5g ; 95%酒精100ml
注:此溶液呈黄褐色即失效。
⒒ 橘红G(orange G)酒精溶液 为酸性染料,染细胞质,常作二重或三重染色用。
配方:橘红G 1g ; 95%酒精100ml
⒓ 番红(safranin O) 为碱性染料,适用于染木化、角化、栓化的细胞壁,对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。并能与固绿、苯胺兰等作双重染色,与橘红G、结晶紫作三重染色。
配方:(1)番红水溶液 番红0.1或1 g ;蒸馏水100ml
(2)番红酒精溶液 番红0.5或1 g ;50%(或95%)酒精100ml
(3)苯胺番红酒精染色液
甲液 番红5 g +95%酒精50ml
乙液 苯胺油20ml +蒸馏水450ml
将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀,过滤后使用。
⒔ 固绿(fast green) 又称快绿溶液。为酸性染料,能将细胞质,纤维素细胞壁染成鲜艳绿色,着色很快,故要很好的掌握着色时间。
配方:(1)固绿酒精液 固绿0.1 g ; 95%酒精100ml
(2)苯胺固绿酒精液 固绿 1 g ;无水酒精 100ml ;苯胺油 4ml
配后充分摇匀,过滤后使用。现配现用效果好。
⒕ 苏木精(hematoxylin)染液 苏木精是植物组织制片中应用最广的染料,是苏木科植物苏木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料,而且可以分化出不同颜色。配方很多,现举海登汉氏(Heidenhain's)苏木精染色液,又称铁矾苏木精染色液。
配方:甲液(媒染剂): 硫酸铁铵(铁明矾)2-4g ;蒸馏水100ml
(必须保持新鲜,最好临用之前配制)
乙液(染色剂):苏木精 0.5-1g ;95%酒精 10ml;蒸馏水 90ml
配制步骤:(1)将苏木精溶于酒精中,瓶口用双层纱布包扎,使其充分氧化(通常在室内放置两个月后方可使用)。(2)加入蒸馏水,塞紧瓶口,置冰箱中可长期保存。
切片需先经甲液媒染,并充分水洗后才能以乙液染色,染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。
铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂,但要注意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。
⒖亚甲基蓝染液 常用于细菌、活体细胞等的染色。
取0.1g亚甲基蓝,溶于100ml蒸馏水中即成。
⒗詹纳斯绿B(Janus green B)染液
将5.18gJanus 绿溶于100ml蒸馏水,配成饱和水溶液。用时需稀释。稀释的倍数应视材料不同而异。
⒘硫堇染液
取0.25克硫堇(也称劳氏青莲或劳氏紫)粉末,溶于100ml蒸馏水中,即可使用。使用此液时,需要用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能成多色反应。
18.黑色素液
水溶性黑素10g,蒸馏水100mL,甲醛(福尔马林)0.5mL。可用作荚膜的背景染色。
19.墨汁染色液 :国产绘图墨汁40mL,甘油2mL,液体石炭酸2mL。先将墨汁用多层纱布过滤,加甘油混匀后,水浴加热,再加石炭酸搅匀,冷却后备用。用作荚膜的背景染色。
20.吕氏(Loeffier)美蓝染色液
A液:美蓝(methylene blue,又名甲烯蓝)0.3g,95%乙醇30mL;
B液:0.01%KOH100mL。
混合A液和B液即成,用于细菌单染色,可长期保存。根据需要可配制成稀释美蓝液,按1∶10或1∶100稀释均可。
21.革兰氏染色液
(1)结晶紫(cristal violet)液:结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵水溶液80mL。将两液混匀置24h后过滤即成。此液不易保存,如有沉淀出现,需重新配制。
(2)芦戈(Lugol)氏碘液:碘1g,KI 2g,蒸馏水300mL。先将KI溶于少量蒸馏水中,然后加入碘使之完全溶解,再加蒸馏水至300mL,即成。配成后贮于棕色瓶内备用,如变为浅黄色 能使用。
(3)95%乙醇:用于脱色,脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。
(4)稀释石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱液(碱性复红1g,95%乙醇10mL,5%石炭酸90mL)10mL,加蒸馏水90mL。
(5)番红溶液:番红O(safranine O,又称沙黄O)2.5g,95%乙醇100mL,溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中,用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。
以上染色液配合使用,可区分出革兰氏染色阳性(G+ )或阴性(G- )细菌,前者蓝紫色,后者淡红色。
22.齐氏(Ziehl)石炭酸复红液:碱性复红0.3g溶于95%乙醇10mL中为A液;0.01%KOH溶液100mL为B液。混合A、B液即成。
23.姬姆萨(Giemsa)染液
(1)贮存液:称取姬姆萨粉0.5g,甘油33mL,甲醇33mL。先将姬姆萨粉研细,再逐滴加入甘油,继续研磨,最后加入甲醇,在56℃放置1-24h后即可使用。
(2)应用液(临用时配制):取1mL贮存液加19mLpH7.4磷酸缓冲液即成。也可以贮存液∶甲醇=1∶4的比例配制成染色液。
24. 1%瑞氏(Wright's)染色液
称取瑞氏染色粉6g,放研钵内磨细,不断滴加甲醇(共600mL)并继续研磨使溶解。经过滤后染液须贮存一年以上才可使用,保存时间愈久,则染色色泽愈佳。
细胞取材及制片的常用方法
实验材料的选择,应以取材方便、制片简单、观察效果好为原则。由于藓类植物的叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶制片,作为实验材料的首选对象。
上表皮受光照强,叶绿体小而多(小,保护自己不被灼伤。多,保证光合速率足够大)下表皮的叶绿体大而少。大叶绿体观察方便。
叶表皮细胞中不能看见叶绿体。但是,叶的上下表皮上有形成气孔的保卫细胞,保卫细胞中有叶绿体。所以不能说不含。
叶肉和下表皮剥离很麻烦。既然不影响结果,能省则省。
体液细胞学制片的最佳方式为
标本在输运送过程中,应防止标本容器的破碎和标本的丢失,注意容器的密闭、避光(如阳光直射下血中胆红素会分解),同时应注意生物安全,防止意外发生。常见检验项目标本转送要求:
1、采样后须立即送检的常规项目血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养,特别是厌氧菌培养。
2、采样后0.5小时内送检的常规项目血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、真菌等。
3、采样后1~2小时内送检的常规项目各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。
4、采集后立即冰冻的检测项目需要对标本冰冻的检测物质有促肾上腺皮质激素(ACTH)、乙酰胆碱酯酶(ACE)、丙酮、血氨、游离脂肪酸、乳酸、丙酮酸盐和肾素。
5、需避光的检测项目感光物质需避光以保持稳定性,如胆红素、β-胡罗卜素和红细胞原卟啉等,可以用铝制盖子罩在试管外壁光。