western中封闭的作用(western为什么要封闭)
western为什么要封闭
封闭是Western Blot 至关重要的一部分， 所以正确的封闭液选择可以让抗体更特异地和抗原结合，为成功的WB奠定基础。
1、脱脂奶粉
最便宜而且最好买的封闭剂就属脱脂奶粉了。通常封闭液的浓度为 2.5-5% （w/v）。
2、牛血清白蛋白(BSA)
牛血清白蛋白是从牛血清中提纯之后的一种球蛋白，通常含有BSA的封闭液的浓度为2-5%（w/v）。
3、全血清
全血清是许多蛋白质的混合物，例如胎牛血清、兔血清、山羊血清等，同样可以被用来当做封闭剂。通常使用的浓度为 5-10%（w/v）。
western封闭温度
1. 温度：澳大利亚必和必拓(BHP)公司西港钢厂(Western Port Works)的终轧温度(FT)为910℃,卷取温度(CT)为720℃,这引起钢卷边部形成酸洗都难以去除的氧化铁皮结构(即边部氧化铁皮),明显降低了整个酸洗过程的速度.
2. 用：第二年参加了cqww ssb的比赛,当时是第一次比赛,临时报佛脚看了比赛规则,学习了dos版的比赛软件的使用(ct),抱着学习的态度参与了比赛. 谁知仅仅用一根直立天线,比赛的成绩竟然超过了以前中国地区同组的记录(单人全波段低功率组),
3. 计算机断层摄影术：到目前为止,阑尾炎仍然值得注意因为超声检测结果具有一定的不确定性,计算机断层摄影术(CT)成为了医生做进一步检查的方法. 但第二军医大学长海医院中医科近日在提取高纯度蜂毒素的基础上,开展了蜂毒素抗肿瘤的疗效及作用机制的研究,
4. 大鼠降钙素：大鼠促生长激素释放激素(GRH) 大鼠促肾上腺皮质激素(ACTH) 大鼠促卵泡素(FSH) 大鼠雌二醇受体(ER) 大鼠心钠肽Pro-ANP(1-98) 大鼠大内皮素(BigET) 大鼠降钙素(CT) 大鼠骨钙素(OT)ELISA Kit 大鼠促甲状腺素(TSH) 大鼠皮质醇
5. ct：combined therapy; 化疗
6. ct：currrent transformers; 电流互感器
7. ct：chlamydozoa trachomatis; 沙眼衣原体
8. ct：cruor time; 凝血时间
western 封闭
可以 封闭是为了阻碍抗体非特异性与膜结合。如果封闭液是牛奶的话泡两天会变臭吧~可以把膜泡在TBS中。两天以后重新封闭就可以了。 这样可能会导致蛋白条带有一点
扩散，也会损失一些蛋白。但是对最后结果影响不大。
当然要是你目的蛋白丰度很低，不建议这么做。只怕两天以后膜上蛋白扩散加损失，连条带都出不来。
western封闭后用不用清洗
没有毒。tbst缓冲盐溶液简称TBS, 属于常规pH缓冲液，Tween 20能够大大增强TBS的洗涤作用，用于清洗Western Blot 中蛋白印迹膜,或者配制封闭液，是常用分子生物学试剂。产品优势独特配方可有效降低背景，增强信噪比。储存条件4℃保存。注意事项请用水稀释成1×方可使用。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
western没封闭好有什么后果
推荐用TBST进行稀释获得5%的牛奶封闭液（5g/100mL）。
很多人的经验是：脱脂牛奶封闭后背景比较干净，而检测磷酸化蛋白则用BSA（因脱脂牛奶含有较多的磷酸化蛋白，会干扰的）
western封闭的原理
western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用 在western blot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将PVDF膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。 所以western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用
