dna限制酶作用(dna限制酶的化学本质)
dna限制酶的化学本质
因为如果在真核细胞内,会对自身丰富的DNA造成破坏,
而原核生物用它来切除外来基因保护自身的.
限制性内切酶当中“限制”这两个字,就是因为科学家发现,有些原核生物体内存在某种酶,能够将进入体内的外源基因切除降解,从而达到限制外源基因入侵自身基因组的目的,于是科学家就把原核生物体内这类能够降解外源基因的酶叫做限制性核酸内切酶。而目前发现的限制性内切酶都存在于原核生物体内,原核生物不像真核生物,体内有一系列DNA修复系统,它们只能依靠简单方式来保证自身遗传稳定性,限制作用就是典型的例子。
限制酶的化学本质是RNA吗
酶的定义: 催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体。是生物催化剂,能通过降低反应的活化能加快反应速度,但不改变反应的平衡点。绝大多数酶的化学本质是蛋白质。酶的特性
1.高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高,使得反应速率更快;
2.专一性:一种酶只能催化一种或一类底物,如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽;
3.多样性:酶的种类很多,大约有4000多种;
4.温和性:是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的。
5.活性可调节性:包括抑制剂和激活剂调节、反馈抑制调节、共价修饰调节和变构调节等。 6.有些酶的催化性与辅因子有关。 7.易变性,由于大多数酶是蛋白质,因而会被高温、强酸、强碱等破坏。 一般来说,动物体内的酶最适温度在35到40℃之间,植物体内的酶最适温度在40-50℃之间;细菌和真菌体内的酶最适温度差别较大,有的酶最适温度可高达70℃。动物体内的酶最适PH大多在6.5-8.0之间,但也有例外,如胃蛋白酶的最适PH为1.8,植物体内的酶最适PH大多在4.5-6.5之间。 酶的这些性质使细胞内错综复杂的物质代谢过程能有条不紊地进行,使物质代谢与正常的生理机能互相适应.若因遗传缺陷造成某个酶缺损,或其它原因造成酶的活性减弱,均可导致该酶催化的反应异常,使物质代谢紊乱,甚至发生疾病.因此酶与医学的关系十分密切。每个细胞由于酶的存在才表现出种种生命活动,体内的新陈代谢才能进行。酶是人体内新陈代谢的催化剂,只有酶存在,人体内才能进行各项生化反应。
DNA酶本质
DNA聚合酶(DNA polymerase)是细胞复制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板,从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具备模板、引物、dNTP等的情况下)及其相辅的活性。
dna限制酶的特点
限制酶的专一性是指限制酶只认DNA的特定片段,那只与碱基的排列有关,跟DNA的来源无关,所以限制酶可以切割来源不同的DNA,不然切割后怎么用连接酶连接呢
dna酶与限制酶的区别
基因工程中,限制酶的切割位点主要取决于限制酶能识别的特定的碱基序列。限制酶一般用于切割含目的基因的DNA片段和切割质粒。切割时需要把握的几个原则:
1.选择限制酶切割质粒,不能把质粒上的标记基因都切掉,最少保留一个标记基因。
2.选择限制酶,一般选择限制酶的识别序列是离质粒上的启动子最近的切割位点的酶。
3.为了避免质粒的自身环化,可以选择双酶切。
酶的化学本质是dna
核酶主要是DNA酶和RNA酶,而这些酶的作用是水解DNA和RNA的。主要作用的是磷酸二酯键。这些酶的化学本质是蛋白质,所以是在核糖体里当中合成的。这些酶主要是在细胞质当中发挥作用,当然也就主要分布在细胞质当中。细胞核当中也有少量的分布。
用不同限制酶处理DNA的目的
用同种限制酶切割目的基因和载体,有三种连接方式。载体的自身环化,目的基因的自身环化,载体和目的基因的连接。
与DNA有关的酶
DNA聚合酶I(DNA-pol I),分子量109kD,为单肽链组成,400分子数/细胞,是原核生物的DNA聚合酶,由于发现最早命名为DNA聚合酶I,其他原核生物的DNA聚合酶,按发现的先后顺序分别命名为DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶Ⅴ。
DNA聚合酶I的二级结构以螺旋为主,可划分为A至R共18个螺旋肽段。螺旋肽段之间由非螺旋结构连接。其中H区与I区之间的无规则结构较长,有50个氨基酸残基,I螺旋与O螺旋之间由较大的空隙,可以容纳DNA链,而50个氨基酸的无规结构,就像一个盖子那样与I、O螺旋区共同把DNA链包围起来,使其向一个方向滑动。DNA聚合酶I只能催化延长约20个核苷酸左右,说明它不是复制延长过程中起作用的酶。DNA聚合酶I在活细胞内的功能,主要是对复制中的错误进行校读,对复制和修复中出现的空隙进行填补。