培养基配置ph作用(培养基配置调节ph)
培养基配置调节ph
调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培养基中，边滴边搅拌，并随时用pH试纸测培养基的pH，一直调到培养基的pH为6（5.8~6.5）左右为止
怎么配置培养基
1、目的明确：培养不同的微生物必须采用不同的培养条件；培养目的不同，原料的选择和配比不同；
2、营养协调：微生物细胞组成元素的调查或分析，是设计培养基时的重要参考依据，微生物细胞内各种成分间有一较稳定的比例。
3、理化适宜：指培养基的pH值、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学条件较为适宜。
4、经济节约：配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成份，特别是在发酵工业中，以降低生产成本。
配置培养基的原则和方法
培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等.有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定.
（一）四个原则
1．目的明确在设计新培养基前,首先要明确配制该培养基的目的,例如,要培养何菌?获何产物?用于实验室作科学研究还是用于大规模的发酵生产?作生产中的“种子”,还是用于发酵?等等.
2．营养协调
3．物理化学条件适宜
4．经济节约
（二）四种方法
1．生态模拟 在自然条件下,凡有某微生物大量生长繁殖的环境,则可认为该处一定具备该微生物生长繁殖所必需的营养和其他条件.因此,就可以模拟该天然基质或直接取用该天然基质（经过灭菌）来培养相应的微生物.在实践中,的确可以利用生态模拟的办法来配制各类“初级的”天然培养基.例如,可用肉汤、鱼汁来培养多种细菌；用水果汁来培养各种酵母菌；用润湿的麸皮、米糠来培养多种霉菌；用米饭或面包来培养根霉；用肥土来培养放线菌；以及用玉米芯来培养脉孢菌（Neurosporaspp.）,等等.
2．查阅文献 一个科学工作者决不能事事都依靠直接经验.多查阅、分析和利用一切文献资料上的对自己直接或间接有关的信息,对设计有自己特色的培养基配方有着重要的参考价值.
3．精心设计 在设计、试验新配方时,常常要进行各项因素的比较或反复试验,因此,工作量是很大的.为了提高工作效率,应努力借助优选法或正交试验设计法等行之有效的数学工具.
4．试验比较 要设计一种优化的培养基,在上述三个方法的基础上,最终还得通过实际试验和比较来加以确定.试验的规模一般都遵循由定性到定量、由小而大地逐步扩大的原则.例如,可先在培养皿上作生长谱试验（auxanographicmethod）,然后进行摇瓶培养试验,再进行台式发酵罐试验,最后才扩大到试验型发酵罐和生产型发酵罐的规模.
生长谱试验的基本操作是这样的：如果我们要试的是某一微生物的碳源,则先准备一个不加碳源的琼脂培养基,待融化并冷却至45℃左右时,混入供试菌悬液,摇匀后倒成琼脂平板,俟其凝固后,将待试碳源一一用小镊子夹取少许并整齐地放在平板上.经温箱培养适当时间后,凡在某碳源周围出现该菌的“生长圈”者,即为它可利用的碳源.用同样原理也可寻找合适氮源和生长因子
培养基配置基本原则
按照微生物生长的营养需求及其相互比例配制的.牛肉膏和蛋白胨提供微生物生长所需的蛋白质、核酸和维生素、无机盐（微量元素）,琼脂只为培养基提供半固体的支撑结构,不提供微生物生长的营养.有时,也根据所培养的微生物的特殊需要配制培养基,如特别提供某种营养素,或专门缺乏某种营养素,使微生物得以鉴别、分离.
配置培养基的关键
配制培养基的操作步骤为称量→溶化→定容→调pH→培养基的分装→包扎→灭菌，B正确． 故选：B．
培养基配置的
这里主要归纳一般情况下的培养基配制关键点，因为培养基的配制使用非常重要，从一开始就该避免异常的出现，主要有以下几个方面。
(1)溶化：一般应放在玻璃器皿或搪瓷齐内。加入蒸馏水,隔水加热以促其溶解,加热时应经常搅拌,防止焦结,待其溶解后补足水分。
在使用干燥培养基时,先将蒸馏水按定量加入容器中,然后称取一定量培养基干粉放入水中,静置10—15min,搅拌,振荡,或延长时间以促进溶解,一般不要热,必要时加热,但时间不宜过长,温度不宜过高,避免某些营养成分被破坏.
(2) 校正酸碱度(调节pH)：培养基必须有适当的pH.因此测定pH是培养基配制过程中的重要步骤之一,测定pH的标准温度为25士2℃.调节pH可用无菌的 1mol/l氢氧化钠溶液或10%碳酸钠溶液、1mol/l盐酸溶液.当调节缓冲液的pH时,宜用6mol/l磷酸或10mol/l氢氧化钾溶液.灭菌后 的pH会比灭菌前的pH升高或降低,一般高压灭菌前培养基的pH会比最终pH调高0.2左右,灭菌后基本合适。
因此对培养基、缓冲液、试剂在灭菌前后的 pH均进行测定,并记下每次pH的测定结果,有助于积累数据考察每种培养基、缓冲液、试剂对灭菌程序的耐受性,从而指导灭菌前pH的调节.干燥培养基一般已校正过pH,用时也必须再验证.测定时,一般用指示剂滴入培养基观察其颜色的变化,或用pH计校正,如与所需pH不符,可用以上的酸或碱液加以校正.调 整pH后要加热过滤,使培养基澄清.
(3)培养基的分装：大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认.每次使用前后,均要对分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基前,则要采用无菌硅胶管.
固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中,高压灭菌后根据需要分装平皿或试管.
平皿：倾注平皿,应在无菌室中放置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱中倒置30—60min.让水蒸汽自然蒸发。
斜面：制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养基应用布抹去,以避免污染.
高层斜面：制备高层斜面分装于试管,约占试管容积的1/3,灭菌后趁热放置成高层短斜面,待其凝固后应用。
分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当天(2h内最佳)进行灭菌处理.液体、半固体培养基一般在高压灭前分装,约装试管容积的1/3,在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基,灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中.
培养基的灭菌：培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定.普通培养基采用121℃、103.42kPa灭菌 15min,但容器和装量较大时,应延长至20min.含糖培养基115℃、68.85kPa灭菌30min.含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血 清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌.血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿 素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌.
高压灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到 全部杀灭微生物.以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、68.85kPa灭菌30min为好
如何配置培养基
（1）肉汤液体培养基（固体培养基成分，不加琼脂就是液体的了）：1、成分：牛肉膏0.5g，蛋白胨1.0g，氯化钠0.5g，蒸馏水100mL，pH7.2~7.5。2、制法：加热溶解，调pH值，分装于三角瓶中121℃，20min高压灭菌。（2），LB培养基的配方如下: 蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 10g/L 按比例溶解在蒸馏水中，装入锥形瓶中，用纱布+报纸或牛皮纸封口，高压蒸汽灭菌20分
钟。可以调PH到7.0，一般都不用调，本身就在7.0左右。
培养基（Medium）是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。不同培养基可根据实际需要，添加一些自身无法合成的化合物，即生长因子。有些微生物，如自养型微生物，不需要碳源，所以上述物质只具有一般性。
培养基配置时注意事项
称量→溶解→调PH值→高压灭菌→冷确至45度→倒板→凝固→培养过夜→无菌生长即可使用。
培养基配置调节ph的时间在什么时候
不同微生物所需环境的PH不同，故培养基在配置时需要调节PH。可以用1mol/L的NaOH或者1mol/L的盐酸调节ph，用ph计测量。
