硫酸镁在培养基的作用(硫酸镁在培养基的作用是)
硫酸镁在培养基的作用是
SOB培养基（SOB Medium）是分子生物学常用的大肠杆菌培养基，与LB培养基相比，SOB培养基中含有两倍多蛋白胨，蛋白胨中富含氨基酸及多肽。另外，SOB培养基中含有镁离子，镁离子是高密度培养必须的离子。利用SOB培养基培养大肠杆菌在普通条件（250rpm）下摇瓶培养，菌浓可达到OD600 3-5左右，如果提高转速到350 rpm， OD600最高能够达到10-15。在SOB培养基中的大肠杆菌具有更高的转化效率，因此常用SOB培养基制备感受态细胞。SOB培养基也用来配制SOC培养基。
SOB培养基配方如下：
2.0% 胰蛋白胨（Tryptone）
0.5% 酵母提取物（Yeast Extract)
10mM 氯化钠 (Sodium chloride)
2.5mM氯化钾(Potassium Chloride）
10mM 氯化镁（magnesium chloride）
10mM 硫酸镁 (Magnesium Sulfate)
了解了SOB培养基的相关用途和基本配制方法后，我们来看一下SOC培养基的相关知识。
SOC培养基(SOC Medium)也是分子生物学中常用的培养基，用于制备高效率的大肠杆菌感受态细胞，也用于热激后感受态细胞的复苏。
SOC培养基配方如下：
0% 胰蛋白胨（Tryptone）
0.5% 酵母提取物（Yeast Extract)
10mM 氯化钠 (Sodium chloride)
2.5mM氯化钾(Potassium Chloride）
10mM 氯化镁（magnesium chloride）
10mM 硫酸镁 (Magnesium Sulfate)
20mM 葡萄糖（Glucose）
SOC培养基跟SOB培养基的唯一区别是SOC中包含有20 mM葡萄糖（glucose）。培养基中的葡萄糖充当分解代谢抑制物（catabolite repressor）。大肠杆菌更倾向应用葡萄糖作为碳源。因此在葡萄糖存在的情况下，其他的碳源的分解就会被抑制。在20 mM 葡萄糖存在下，乳糖不会被代谢，乳糖操纵子被抑制，外源基因不会发生表达，这就减少了外源基因表达给细胞带来的生长压力。因此，利用SOC培养基进行转化反应时，热激后细胞生长的速率会比LB培养基中高出很多。
LB培养基是一种培养基的名称，生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种，使菌种成倍扩增，达到使用要求。也可用于培养基因工程受体菌（大肠杆菌）。可分为液体培养基和固体培养基。LB一般被解释为Luria-Bertani培养基，然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法，这个名字来源于英语的lysogeny broth，即溶菌肉汤。
硫酸铁在培养基中的作用
谷氨酸钠（C5H8NO4Na）就是味精的主要成分，不要一看它的名字这么长，就觉得头疼。其实很简单，谷氨酸是一种氨基酸，而钠是一种金属，谷氨酸钠是一种由钠离子与谷氨酸根离子形成的盐。说得更简单一些，如果熬汤的时候，您熬的不是青菜豆腐汤，而是一锅鸡汤的话，您可能会有这种经验——往鸡汤中加一些圣僧盐，味道会更加鲜美。这是因为鸡肉当中富含谷氨酸这种氨基酸，您又放了一些氯化钠盐进去，便在不知不觉当中就制造了谷氨酸钠，也就是味精。
在过去相当长的一段时间里，味精对健康有益还是有害，一直是人们争论的焦点。食用味精在正常范围内不会对健康有任何损害， 但食用过多会使部分人，尤其是西方人，出现中毒症状。所以要适量使用，一般以每人每天不超过20克为宜。
味精的出现至今已有100多年的历史了。1861年，德国的一
位教授从小麦的面筋当中，第一次提取出味精的组成成分谷氨酸。后来到了1908年，日本的池田菊苗又从海带煮出的汁当中，分解出味精，作为人工调料第一次投放市场。目前，国外均是以糖、蜜作为原料来生产味精，而在我国呢，用的是玉米或者大米这样的粮食作物来生产味精。
味精对人体是无害的，而且富含营养，那么，它到底是怎么产生鲜味的呢？
原来，人的味觉器官当中，有一个专门的氨基酸受体。我们知道，味精叫做谷氨酸钠，是一种氨基酸盐，当它被用于菜肴而被人们食用的时候，就会刺激位于我们舌部味蕾上的氨基酸受体，这样我们就可以感到可口的鲜味了。
我们都知道蔬菜当中富含多种维生素，非常有营养，但是还有很多人只喜欢吃肉，不喜欢吃菜，甚至有人没有肉连饭都吃不下去，时间长了就会造成厌食和偏食。为什么呢？这是因为肉中富含谷氨酸，味道较重，而蔬菜就比较素淡，所以，肉吃多了，谁愿意再去吃淡而无味的蔬菜呢。因此，我们在炒菜的时候，稍微放一些味精，就可以使蔬菜的味道更好，使人们更愿意吃它，从而抑制厌食症与偏食症的发生。中国的药膳学认为，味精可以增进食欲，改善体质，也是这个道理。
谷氨酸钠(发酵法)
1957年左右开始采用工业化方法进行生产，现在大部分谷氨酸钠都用此法制得。
制作方法 1.发酵原料：用淀粉、糖化液、废糖蜜和合成醋酸作为炭素源，氮源则用中和了的氨、尿素等。另外还添加一定量的磷酸钾、硫酸镁、硫酸铁等无机盐类和生物素、硫胺(维生素B2)，而且还必须加入适量的青霉素和界面活性剂。
2.加工、发酵：将杀菌后的原料放入大缸中，在其中接种已培养好的种菌。用于生产谷氨酸的菌种已发现多种，但往往采用Micrococcus glutamicus和Brevibacterium属的细菌。加入本培养液5%左右的前培养液，平均每分钟送入为原料容量1/2～1/4的无菌空气，边送边搅拌进行培养，其酸度保持在PH7～8。生产谷氨酸的菌种是一种具有特殊生理性质的细菌。如环境条件不能满足量，则谷氨酸的发酵过程就不能进行。
3.除菌：一般在30～32℃下，经过40个小时培养之后，进行过滤除去菌体而得到谷氨酸溶液。
4.浓缩、析晶、分离：将谷氨酸溶液浓缩而得到谷氨酸结晶体。
5.中和、精制：用氢氧化钠或碳酸钠中和、精制而成谷氨酸钠。谷氨酸的产量为所用糖料的30～50%。
谷氨酸钠(蛋白质分解法)
谷氨酸钠就是我们日常食用的味精，是作为加味成分而分离出的一种晶体物质，称为化学调味料。谷氨酸，是在1866年瑞特豪森(Ritthausen)将小麦麸用硫酸水解而得到的酸性氨基酸。1908年池田菊苗博士，利用海带单独分离出味美成分，并证明了这种味美成分就是谷氨酸钠盐，从而生产化学调味料。
制作方法 该法是最早采用的一种方法：1.在麸质、脱脂大豆等蛋白质中，含有大量谷氨酸，加入2～3倍的20%的盐酸，用高压锅以120℃的温度加热10小时左右，水解而得到氨基酸混合液。
2.再进行过滤、减压浓缩并加入浓盐酸之后冷却，即析出谷氨酸盐酸盐。
3.将此盐酸盐进行分离，再放入水中溶解，中和至PH3.2，即得到谷氨酸的结晶体。
4.将此结晶体过滤溶解于温水中，用氢氧化钠或碳酸钠粉中和至PH6.5，再用活性炭脱色，过滤，减压浓缩而得到谷氨酸-钠盐，分离出结晶，进行干燥而成制品。
硫酸铵在培养基的作用
小球藻培养基的配制？小球藻通常使用SE培养基（SE Medium）和Pr培养基（Pr Medium），也可以使用BG-11培养基(BG-11 Medium)培养。栽培 生物学特性 小球藻生于热带、温带淡水和海水中，以细胞分裂进行无性繁殖，并可产生配子进行有性繁殖。温度保持在20-23℃、光强度5000-10000 lx、pH8、盐度含量在20%-30%的条件下培养最适宜生长。 养殖技术 在初春设置500-1000L的浅水槽，用最小网目的网过滤海水3份、淡水1份放满水槽，每1000kg水加入硫铵300g，过磷酸钙50g，配成培养液，放入小球藻藻种，1个月后小球藻即可繁殖生长。
硫酸镁在培养基中的作用
培养基是香菇菌丝体生长发育的基质、可以提供香菇菌丝体生长发育所必需的水分、碳源、氮源、各种元素和生长因素，使菌丝体能正常、健壮地生长。
a.水分：香菇菌丝中含有大量的水分。水分不仅是菌丝细胞原生质的主要成分，而且菌丝的一切生理活动均需在有水的情况下进行。因此，在配制各级培养基时，均要加入一定量的水分。
b.碳源：单糖(葡萄糖)、双糖(蔗糖、麦芽糖)、多糖(淀粉)都是香菇菌丝能够利用的有机碳源。一般来说，碳素是菌丝细胞中有机物的基本元素，并且也是能量的来源。
c.氮源：氮素是构成菌丝细胞中的蛋白质和核酸的主要元素，而蛋白质和核酸又是细胞质和细胞核的重要成分，生命活动中起着重要的生理作用。有机氮(氨基酸、蛋白质、尿素)和氨态氮(硫酸铵)都是菌丝细胞氮的来源。
d.无机盐类：菌丝所需的无机盐类数量很少，但在其生命活动中都是不可缺少的。在配制培养基时，要加入少量的磷、钾、硫、钙、镁等。培养基中加入磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸钙等，可满足对上述元素的要求。
e.生长因素：能调节香菇菌丝代谢活动的微量有机物，称之为生长因素。一般用作碳源的天然成分，如马铃薯、麦芽汁、麸皮、米糠等都含有丰富的生长因素，无需另加。维生素B1可促进香菇菌丝生长，制斜面培养基时可加入少量。
f.凝固剂：常用的凝固剂为琼脂(洋菜)，是由石花菜提制而成。培养基中各种营养物质的比例对香菇菌丝生长的影响很大。要根据香菇菌丝生长对各种营养物质的需要按比例配制。要注意对培养基pH值的调节。
<2>培养基配制的方法
香菇菌种分为母种、原种和栽培种三种。
a.母种培养基的制作配方：
马铃薯200克;葡萄糖20克;琼脂18～20克;水1000毫升(pH值5.5～6)
该配方适合香菇及多种食用菌分离和培育母种之用。如果作保藏菌种用，在配方中可再添加磷酸二氢钾2克，硫酸镁0.5克，维生素B110毫克。
制法：选择质量好的马铃薯洗净去皮(已发芽的要挖去芽及周围一小块)，将其切成薄片，称取200克。放入铝锅中，加入清水1000毫升，加热煮沸，维持30分钟，用四层纱布过滤，取其汁液，然后将琼脂放在水中浸泡后加入马铃薯汁液中，继续加热至全部溶化(加热过程中要用玻璃棒不断搅拌，以防溢出和焦底)，最后加入葡萄糖，并且热水补足1000毫升，测定并调节pH值(用5%的稀盐酸或5%的氢氧化钠溶液)到所需范围内。配制好的培养基要趁热分装入试管，装入量约为试管长度的1/5，装管时要注意勿使培基沾附试管口。分装完毕塞上棉塞，棉塞要求松紧适度，塞入长度约为棉塞总长度的2/3左右，使之既有利通气又能防止杂菌侵入。
塞好棉塞后，把试管直放在小铁丝筐中，盖上油纸或牛皮纸，用绳扎好，或用绳子把试管扎成几捆，棉塞部分用牛皮纸包扎好，竖直放入高压灭菌锅内，进行灭菌，在1.5公斤/厘米2压力下维持30分钟。
灭菌后，待培养基温度下降至60℃时，再撰成斜面，以防冷凝水积聚过多。摆斜面时，先在桌上放一木棒，将试 管逐支斜放，使斜面长度不超过试管总长度的 1/2，冷却凝 固后，即成斜面培养基。
灭菌后的斜面培养基，要进行无菌测定，可从中取出2～3支，放入30℃左右的恒温箱中培养3天，培养后表面如 仍光滑，无杂菌出现，就可供接种。多次制作后，已有把握，可不做无菌测定试验。
高压灭菌操作步骤和注意事项：
(Ⅰ)在灭菌锅内加水至水位标记高度，首次使用需先进行一次试验，水过少易烧干造成事故，水过多棉塞易受潮。
(Ⅱ)放火锅内的材料，不宜太挤，否则会影响蒸汽的流通和灭菌效果。体积大的瓶子，要分层放置或延长灭菌的时间。
(Ⅲ)盖上锅盖，同时均匀拧紧锅盖上的对角螺旋，勿使漏气，关闭气阀。
(Ⅳ)点火、逐渐升温。水沸后，待锅内压力升至0.5 公斤/厘米2时，逐渐开大放气阀，放净锅内冷空气至压力降至"0"，再关闭放气阀。如不放尽冷空气，即使加大至所需压力，而温度达不到应有的程度，也不能达到彻底灭菌的要求。
(V)继续DO%至所需压力时，开始记灭菌时间，调节火力大小，始终维持所需压力至一定时间。
(Ⅵ)停火。让压力自然回降至"0"时，打开放气阀。
(Ⅶ)打开锅盖，用木块垫在盖下，让蒸汽渐渐溢出，借余热烘干棉塞。
(Ⅷ)取出已灭菌的材料，并清除剩水，以防锅底锈蚀。
b.原种培养基的制作
配方甲：
锯木屑78%;米糠(或麸皮)20%;蔗糖1%;硫酸钙(石膏粉)1%;水适量;
配方乙：
棉籽壳40%;锯木屑40%;麸皮或米糠20%;蔗糖1%;石膏粉1%;水适量
制法：木屑以阔叶树的为好，棉籽壳(木屑)均要求干燥无霉烂、无杂质。米糠或麸皮要求新鲜、无虫。将木屑(或棉籽壳)与麸皮、石膏粉拌匀，蔗糖溶于水，将其加直至用手紧握一把培养料时，指缝间有水渗出而不下滴为宜。然后将其装入菌种瓶中，边装边用捣木适度压实，直装至瓶颈处为止，压平表面，再在培养基中央钻一洞直达瓶底。最后用清水洗净瓶的外壁及瓶颈上部内壁处，上棉塞。用牛皮纸包住棉塞及瓶口部分，用绳扎紧。放入高压锅内，在1.5 公斤/厘米2的压力下维持1.5小时。如采用土法灭菌，当蒸笼内达100℃后再维持6～8小时。
c.栽培种培养基的制作
栽培种培养基的配方及制作方法同源种。当采用其他用料栽培香菇时，可将上述两种配方中的锯末屑用料代替，其余成分不变，构成多种代用料配方。
<3>菌种的分离和培育
香菇菌种制作分母种、原种、栽培种三个逐步扩大的阶段。实践证明，香菇菌种的好坏优劣，不仅直接影响到香菇的产量和质量，而且关系到香菇栽培的成败。因此，必须认真做好菌种分离和培育工作。
a.母种的分离和培育
母种是菌种生产的关键，直接关系到原种和栽培种的质量，也是香菇丰产的保证。因此，必须认真做好种菇的选择和分离培育工作。
种菇要选择符合该品种特性的个体：要在出菇早、出菇均匀、产量高的菌块上或菇木上挑选，选出朵形端正、盖肉肥厚、柄短粗、无虫害的子实体做种菇。
组织分离法：选择符合种菇要求的菇蕾。用75%酒精揩拭表面后，用小刀把菇蕾纵剖为二，在菌盖与菌精交界 处，切取0.5立方厘米的一小块菌肉，移放在斜面培养基中央。如用已开伞的香菇做分离材料，则选菌盖与菌柄交界的菌肉。
接种后，将试管放在22℃～24℃恒温箱中培养2～3天后，组织块上长出白色的菌丝，并向培养基上蔓延生长。当菌丝在斜面上长满后，再移到新的斜面培养基上，培育成母种。
b.原种和栽培种的培育
把母种接到木屑(或棉籽壳)、米糠培养基上进行培育，用以繁殖栽培种用的菌种称为原种。已培育好的母种用接种针挑取蚕豆大一小块放入原种培养基上，经22℃～24℃下培育35～45天，菌丝体长满全瓶，即成原种。母支每种约可接6～8瓶原种。
原种直接到相同培养基中扩大培养;用于压块用种为栽培种。从原种里掏出菌种移入灭过菌的瓶子中，培养温度22℃～24℃，培育时间约2个月以上。每瓶原种可接栽培种60～80瓶。
培育原种和栽培种注意事项：
第一，原种及栽培种的接种必须遵照无菌操作要求。
第二，当接种后，从第三天开始就要经常检查有无杂菌污染，发现有污染的瓶子要及时取出处理。一般检查要继续到香菇菌丝体覆盖整个培养基表面并深入培养基2厘米时为止。
第三，培养好的菌种如暂时不用，要将其移放在凉爽、干净、清洁的室内避光保存，勿使菌种老化。
<4>菌块的制作
掏瓶作块的时间，7月中旬制作的栽培种，10月上旬即可掏瓶作块。掏瓶时要求作到：掏瓶用具、瓶口、盛器及掏铲等所用工具均用0.1%高锰酸钾溶液或2%～3%来苏儿消毒;要剥尽老化褐色菌皮，要尽量成块掏出，切勿掏得过碎;要随掏随做块，不要推得过久，更不宜过夜。
做块方法：将掏出的菌种倒入30厘米见方，边高为7厘米的框内，用手压实，四周要紧一些，块的表面压平，不宜过紧过松。用配方甲一般11～12瓶菌种可做菌砖一块(30厘米2)，厚度以4.5厘米左右;若用配方乙时，一般12瓶菌种做一块，厚度6厘米上下为宜。
菌块直接压在势有消过毒的塑料薄膜的木架或地上，块与块之间距离3～4厘米，以利空气流通。压好后用薄膜覆盖，以利保湿。
其中正确掌握香菇菌丝的菌龄，选择适宜的季节压块，是香菇生产中的一大关键。
菌丝的生产过程，就是累积营养的过程。当养分积累到一定时期，在外界条件(如温度、水分、空气、光、营养、PH值)影响下，产生突变，以营养生长转入生殖生长，即菌丝生长进入子实体生长。
菌龄太长;瓶壁上形成一层很厚的菌皮，这是营养被消耗、菌龄老化的一种表现，压块后，虽然转色较快，但颜色略淡;这时压块若遇高温(30℃以上)菌丝容易衰老，造成霉烂。菌龄太短，菌丝成熟度不够，仍处旺盛生长阶段，压块后，菌丝容易徒长，转色也慢，颜色黄褐色，由于营养积累不足出菇也就延迟。
因此，压块最适宜的菌龄(即菌丝成熟度)应该是：
① 菌丝发展到瓶底和塑料袋底的10～20天，此时瓶壁处开始呈现白色突起(原基);
②透过瓶可看到瓶内表面的菌丝洁白，中央黄白色;
③揭开瓶盖塞有浓厚的菇香气味;
④菌种上表面覆盖一层黑褐的菌膜，菌种本身粘结力很强。以上四点是完全成熟菌种的特点。
具有以上特点的菌种即可掏瓶做块。由于菌龄适当，压块后菌丝愈合快，转色及时呈红棕色，若外界条件适宜，一般压块后15～20天左右便可现蕾。
菌龄是内因，当菌龄适宜时，还必须给其合适的外界环境条件，才能使菌丝体发生突变，形成子实体。香菇属变温型菌类，菌丝体生长适温是25℃，子实体是15℃。如关中地区一般在10月上中旬压块，此时气温已降至25℃以下，并在做块后则天内，能维持22℃～25℃;以后气温下降，正值出菇时期，因此，各地栽培香菇必须根据当地气候条件正确确定做块时期，才能获得香菇的高产。
在培养基中添加硫酸镁磷酸二氢钾是为食用菌提供什么
一、母种制作技术
一般处于保存期的大球盖菇菌种的菌丝处在缓慢生长或停止生产状态,所以在制作生产用的母种前,必须对保存的菌种进行复壮,以便将处于旺盛生长状态的菌种接入母种或原种培养基上,促进菌丝快速生长,获得菌丝粗壮、浓白、生长势旺的菌种。
1．培养基配方：I号：PDA(马铃薯200g、葡萄糖18g、琼脂18g、水1000m1).Ⅱ号：PDA+硫酸镁1．5g+磷酸二氢钾3g+蛋白胨2g、水1000ml.Ⅲ号：马铃薯100g、干杂木屑100g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml。
上述配方的培养基经高压20分钟灭菌消毒后制成试管斜面，3天内用完。
2．制作方法：通过组织分离技术，将选取的大球盖菇组织块接入I号培养基上(或接入需复壮的保存种)。在24--28℃条件下经10--15天培养,菌丝长至试管1／3--1／4时,挑取菌丝扩展前端浓密、粗壮的部分转入Ⅱ号或Ⅲ号培养基上，采用两点接种法，以使菌丝迅速长满培养基表面(一般15--20天)提高菌丝的质量.经Ⅱ号、Ⅲ号复壮培养基培养的菌丝表现为浓白、粗壮、生命力强，以利原种菌丝的生长，缩短原种培养时间,提高成品率。
二、原种及生产种制作
1．配方：I号：小麦或大麦88％、米糠或麦麸10％、石膏或碳酸钙1％、石灰0．5％、含水量65％(加入米糠或麸皮主要是使培养基疏松,增加透气性,菌丝走向好).Ⅱ号：小麦25％、稻草64％、麦麸10％、石膏粉1％、含水量65％--70％.Ⅲ号：杂木屑42％、杂刨木花42％、米糠或麦麸15％、硫酸镁0．2％、石膏或碳酸钙1％、含水量70％.
以上配方在1．3--1．5kg／平方米压力下,消毒2--2．5小时,3天内用完.
2．原料选择和配制：实践证明：制作大球盖菇原种和生产种的培养基主原料以麦粒最好,木屑、刨木花次之,稻草最差。
(1)麦粒的选择：应选深黄或暗红色皮韧性大、浸泡时不易破皮的麦粒为好，从吸水率来看大麦优于小麦。
(2)浸泡：浸泡分石灰水浸泡和清水浸泡预煮后加石灰两种方法。前者用1％石灰水浸泡，pH值9--10，在25℃小麦浸泡8--9小时，大麦浸泡9--10小时，夏季水温高应适当缩短时间。浸泡好的小麦粒，用手指甲掐麦粒凹陷,有较强的弹性，指甲印很快消失为宜。后者用清水先浸麦粒，时间与上相同。浸好的麦粒涝起用清水冲洗后沥干，放入锅内煮至刚沸为止涝起凉开，加入铺料混合，用0．5％石灰调pH6．5左右,含水量65％。
(3)装瓶及消毒：选用容积700ml，瓶口内径为3cm左右的耐高温玻璃瓶(不宜用广口瓶,以免杂菌侵入)，将配好混匀的培养料装入瓶中，每瓶装200--300g为宜，在1．3--1．5kg／平方米压力下消毒2--2．5小时，切忌消毒时间过长以免麦粒呈糊状,导致透气性和养分下降，影响菌丝生长。
(4)接种和培养：采取多点式接种,即在瓶内培养料四周按适当的距离接种3--4点,料面上再接小块菌种，在24--28℃条件下,暗培养7--10天，菌丝萌发生长至直径4cm左右的菌斑时，立刻对菌丝进行人工搅拌，搅拌时接种点的菌丝被搅断受刺激，同时由于开瓶口(在超净台上进行)实际上给菌丝起增氧作用,有利于菌丝迅速生长，一般整个培养过程需25--30天可长满瓶。
3．生产种制作：
(1)配方、培养基制作、瓶子选择和消毒与原种相同
(2)接种：将长满瓶的原种接种到生产培养基表面上，尽量铺满料面，以免杂菌污染，每瓶原种接不超过30瓶生产种，在24--28℃条件下培养7--10天菌丝萌发生长至洁白、浓密粗壮时,对菌丝进行人工搅拌，搅断菌丝，刺激其快速生长，一般20--25天长满全瓶。
