宿主细胞在基因工程中的作用(基因工程常用宿主菌为)
基因工程常用宿主菌为
质粒作为载体必须具备的条件：多个酶切位点、对受体细胞没有危害并易于分离、能自我复制并稳定保存、具有特殊的标记基因，质粒广泛存在于生物界，从细菌、放线菌、丝状真菌、大型真菌、酵母到植物，甚至人类机体中都含有。
从分子组成看，有DNA质粒，也有RNA质粒，从分子构型看，有线型质粒、也有环状质粒，其表型也多种多样。细菌质粒是基因工程中最常用的载体。
质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子，存在于细胞质中，但酵母除外，酵母的2μm质粒存在于细胞核中，具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息，是闭合环状的双链DNA分子。质粒不是细菌生长繁殖所必需的物质，可自行丢失或人工处理而消除，如高温、紫外线等。质粒携带的遗传信息能赋予宿主菌某些生物学性
基因工程菌株的特点
基因定序是指分析特定DNA片段的碱基序列，也就是腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、胞嘧啶（C）与鸟嘌呤的（G）排列方式。
基因定序的快速测序速度已经有助于达到测序完整的DNA序列，或多种类型的基因组测序和生命物种，包括人类基因组和其他许多动物，植物和微生物物种的完整DNA序列。
基因定序测序目的是确定重组DNA的方向与结构，对突变进行定位、鉴定和比较研究。
基因定序测序方法:
1.自动测序法。
采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳，应用该公司专利的四色荧光染料标记的ddNTP(标记终止物法)，因此通过单引物PCR测序反应，生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物，使得四种荧光染料的测序PCR产物可在一根毛细管内电泳，从而避免了泳道间迁移率差异的影响，大大提高了测序的精确度。
2.非同位素银染色法。
是一种无放射性的序列分析系统，它通过灵敏的银染方法检测凝胶中的条带。银染提供了一种对于放射性或荧光法来说更加快速，廉价的替代方法。
3.鸟枪法。
是一种由生物基因组提取目的基因的方法。首先利用物理方法(如剪切力、超声波等)或酶化学方法(如限制性内切核酸酶)将生物细胞染色体DNA切割成为基因水平的许多片段，继而将这些片段与适当的载体结合，将重组DNA转入受体菌扩增，获得无性繁殖的基因文库，再结合筛选方法，从众多的转化子菌株中选出含有某一基因的菌株，从中将重组的DNA分离、回收。
基因表达最常用的宿主菌
可提供近万种质粒载体、菌株、基因和细胞株,并可提供实验技术外包服务,如基因克隆、质粒构建、蛋白原核、真核表达及纯，pQE 载体，原核表达载体，克隆载体 ，毕赤酵母表达载体，毕赤酵母宿主菌，酿酒酵母表达载体 ，酿酒酵母宿主菌，真菌表达载体，真核哺乳动物荧光载体，真核哺乳动物载体，植物表达载体，大肠杆菌宿主菌，枯草宿主菌pET载体pfastIII，昆虫表达系统
基因工程常用宿主菌为哪种
生物工程定义
生物技术，有时也称生物工程，是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产所需产品或达到某种目的。因此，生物技术是一门新兴的，综合性的学科。
先进的生物技术手段是指基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程和蛋白质工程革新技术。改造生物体是指获得优良品质的动物、植物或微生物品系。生物原料是生物体的某一部分或生物
生长过程所能利用的物质，如淀粉、糖蜜、纤维素等有机物，也包括一些无机化学品，甚至某些矿石。
生物技术的种类及其相互联系
近十几年来，科学和技术发展的一个显著特点，就是人们越来越多地采用多学科的方法来解决各种问题。这将导致综合性学科的出现，并最终形成具有独特概念和方法的新领域。生物技术就是在这种背景下产生的一门综合性的新兴学科，根据生物技术操作的对象及操作技术的不同，生物技术主要包括以下五项技术（工程）。
一基因工程基因工程是20世纪70年代以后兴起的一门新技术，其主要原理是应用人工方法把生物的遗传物质，通常是脱氧核糖核酸（DNA）分离出来，在体外进行切割、拼接和重组。然后将重组了的DNA导入某种宿主细胞或个体，从而改变他们的遗传品性。有时还能使新的遗传信息在新的宿主细胞或个体中大量表达，抑或基因产物（多肽或蛋白质）。这种创造新生物以特殊功能的过程就成为基因工程，也称DNA重组技术。
二细胞工程一般认为，所谓的细胞工程是指以细胞为基本单位，在体外条件下进行培养反之，或人为使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而达到改良生物品种和创造新品种，加速繁育动植物个体，或获得某种有用的物质的过程。所以细胞工程应包括动植物细胞的体外培养技术，细胞融合技术，单克隆抗体，核移植，胚胎移植技术等。
三酶工程酶工程是利用酶、细胞器或细胞所具有的特异催化功能，借助生物反应装置和工艺过程来生产人类所需产品的一项技术，包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造化技术及酶反应的设计等技术。
四发酵工程利用微生物生长速度快，生长条件简单以及新陈代谢过程特殊等特点，在合适条件下，通过现代工程技术手段，由微生物的某种特定功能生产出人类所需的产品称为发酵工程，有时也成微生物工程。
五蛋白质工程
蛋白质工程是指在基因工程的基础上，结合蛋白质结晶学、计算机辅助设计和蛋白质学等多学科的基础知识，通过对基因的人工定向改造等手段，从而达到对蛋白质进行修饰、改造、拼接以产生能满足人类需要的新型蛋白质。
基因工程制药中使用最广泛的宿主菌是
基因工程载体:在基因工程重组DNA技术中将DNA片段（目的基因）转移至受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。
三种常用的载体是质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒，最常用的是质粒。用途：在基因操作过程中使用运载体有两个用途：
一是用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去；
二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。基因工程中载体需要满足的条件：
1有一个或多个限制酶的切点，便于目的基因插入2有自我复制能力或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA复制的能力3必须带有标记基因，以便筛选4对受体细胞无害5大小合适，便于操作天然质粒并不完全具备上述条件，所以都要进行人工改造。
基因工程常用宿主菌为几类
先说一下两者的定义：
基因组文库：用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA，可以得到大量的基因组DNA片段，然后将这些DNA片段与载体连接，再转化到细菌中去，让宿主菌长成克隆。这样，一个克隆内的每个细胞的载体上都包含有特定的基因组DNA片段，整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和称为基因组文库。
cDNA文库：以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。
通过比较不难看出其中的区别：
1、cDNA文库特异地反映某种组织或细胞中，在特定发育阶段表达的蛋白质的编码基因（响应的mRNA），因此cDNA文库具有组织或细胞特异性。
2、而基因组文库是把某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌克隆子群体中，方便日后对生物的整个基因组进行研究。
基因工程的宿主与载体
基因载体本身是DNA，除根据其来源分为质粒载体、噬菌体载体、病毒载体等外，还可以根据它们的主要用途分为克隆载体与表达载体。根据它们的性质分为温度敏感型载体、融合型表达载体、非融合型表达载等。基因载体的作用是运载目的基因进人宿主细胞，使之能得到复制和进行表达。
