高渗再生培养基作用(低渗培养基)
低渗培养基
培养基中添加蔗糖而不是葡萄糖,是以大量实验为基础的。大量实验表明,蔗糖能支持绝大多数植物离体培养物的旺盛生长,因此被作为植物组织培养的标准碳源而广泛应用,大多数合成培养基也均以蔗糖作为唯一的碳源。其中的原因可能有下列几个方面:①同样作为碳源和能源物质,蔗糖较葡萄糖能更好地维持培养基内的低渗环境。配制相同质量分数的培养基,蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖,若采用葡萄糖作为碳源,易使植物细胞脱水而生长不良。同时,植物细胞吸收蔗糖的速率要明显慢于吸收葡萄糖的速率,所以蔗糖形成的渗透压可较长时间地保持相对稳定。②植物组织培养过程中,要特别注意防止培养基受到微生物的污染。微生物生长所需的碳源最适合的是葡萄糖,而较少利用蔗糖,因此采用蔗糖作为培养基的碳源,可在一定程度上减少微生物的污染。③从能源供应来说,相同物质的量浓度下,蔗糖比葡萄糖提供的能量多,植物细胞中有能催化蔗糖水解的酶,所以可以用成本较低的蔗糖
而动物摄入的蔗糖要在消化道进行分解为葡萄糖,也就是说动物细胞只能直接用葡萄糖.
高渗培养和普通培养
1、尿液培养色培养基:
睡前少饮水,最好是晨尿,起床后清洗会阴,保证尿液的清洁。然后将尿液10-20毫升接入到无菌容器内。
2、培养方法,
(1)普通培养:将收集标本的容器轻轻旋转混匀,用定量接种环分别取尿液1μl涂抹接种血平板和中国蓝平板,培养温度在35-37摄氏度,时间在一天半至两天的时间,然后观察尿检结果。对于服用抗生素的或是耻骨上膀胱穿刺的标本需要增加一个10μl接种量。
(2)特殊培养:对怀疑有厌氧菌感染者应加种一块巧克力平板,在5%CO2环境中培养48小时。
3、影响培养的因素:
尿液放置时间超过1个小时,细菌量增大。采集前必要的清洁工作没有做好,中段尿不清洁。
低渗作用染色体制备
我是带学生上细胞生物学实验的老师,正好有实验接触压片和滴片,就从实践角度讲讲吧。
压片实验是做植物细胞染色体标本时用到的,就是秋水仙碱处理过的植物根尖,经过固定和酸化处理后,在在玻片上通过压片使染色体分散,具体方法在植物染色体标本的制作与观察这样的实验资料中都有,不难找。
滴片是做动物细胞染色体标本时用到的,同样细胞经过秋水仙碱处理后,固定低渗后,吸取细胞液体,在距离载玻片一定高度下,将细胞液体滴落到倾斜45度放置的载波片上,靠这种力量使染色体分散,所以又称砸片。砸片后,还要将冷的载波片立刻放到酒精灯下烤烤,利用热胀冷缩使染色体进一步分散。
我带着两个实验课还真给学生出过类似的思考题,比较两个实验。简单说,压片的力量比滴片大,原因就是植物细胞有细胞壁,染色体更不容易分散。其中其他的处理步骤也显示出这种差别,这里就不累述了。
低渗培养基有哪些
培养基中添加蔗糖而不是葡萄糖,是以大量实验为基础的。大量实验表明,蔗糖能支持绝大多数植物离体培养物的旺盛生长,因此被作为植物组织培养的标准碳源而广泛应用,大多数合成培养基也均以蔗糖作为唯一的碳源。其中的原因可能有下列几个方面:
①同样作为碳源和能源物质,蔗糖较葡萄糖能更好地维持培养基内的低渗环境。配制相同质量分数的培养基,蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖,若采用葡萄糖作为碳源,易使植物细胞脱水而生长不良。同时,植物细胞吸收蔗糖的速率要明显慢于吸收葡萄糖的速率,所以蔗糖形成的渗透压可较长时间地保持相对稳定。
②植物组织培养过程中,要特别注意防止培养基受到微生物的污染。微生物生长所需的碳源最适合的是葡萄糖,而较少利用蔗糖,因此采用蔗糖作为培养基的碳源,可在一定程度上减少微生物的污染。
③从能源供应来说,相同物质的量浓度下,蔗糖比葡萄糖提供的能量多。
培养基渗透压
lb培养基由蛋白胨,酵母膏,nacl组成。首先,蛋白胨是经过胰酶处理过的蛋白,处理后,大分子的蛋白分子量变小,细菌更容易利用,此外,还含有嘌呤,提供生长因子。
如要培养大肠杆菌,其实用普通蛋白胨代替胰蛋白胨是没有问题的。蛋白胨为细菌的生长提供氮源。
其次培养基中的酵母膏酵母提取物主要成分是氨基酸,小肽,核甘酸,b族维生素,主要为细菌提供维生素和微量元素,是细菌生长所必须的。氯化钠在培养基中的作用是维持渗透压,兼能可提供无机盐。
低渗培养基治疗溶血
TCBS琼脂培养基,英文名称Thiosulfate citrate bile salts sucrose agar culture medium,即硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基。用途:用于霍乱、副溶血性弧菌的分离培养。用法:称取本品 8.9g,煮沸溶解于100ml 蒸馏水中,冷至 60℃时, 倾入无菌平皿 ,无需高压灭菌。
原生质体再生高渗培养基
因为如果在低渗溶液中的话,因为渗透作用,水分会过多地进入原生质体,有可能会导致原生质体破裂,故需要在等渗或高渗溶液中制备。
尿低渗培养
低渗性缺水又称慢性缺水或激发性缺水。此时水和钠同时丢失,但是失钠多余失水,故血清钠低于正常范围,细胞外液呈低渗状态。
机体的代偿机制表现为抗利尿激素的分泌减少,使水在肾小管内的再吸收减少,尿量排出增多,从而提高细胞外液的渗透压,但这样会使细胞外液总量更为减少,于是细胞间液进入血液循环,以部分地补偿血容量。
高渗培养基是什么培养基
细菌L型在体内或体外、人工诱导或自然情况下均可形成,诱发因素很多,如溶菌酶(lysozyme)、溶葡萄球菌素(lysostaphin)、青霉素、胆汁、抗体、补体等。
其中溶菌酶和溶葡萄球菌素能裂解肽聚糖中N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键,破坏聚糖骨架。青霉素能与细菌竞争合成肽聚糖过程中所需的转肽酶, 抑制四肽侧链上D-丙氨酸与五肽桥之间的联结,使细菌不能合成完整的肽聚糖。人与动物细胞无细胞壁,也无肽聚糖结构,故溶菌酶和青霉素对人体细胞无破坏作用。
细菌L型的形态因缺失细胞壁呈高度多形性,大小不一,有球形、杆状和丝状等。着色不匀,无论其原为革兰阳性或阴性菌,形成L型大多染成革兰阴性。细菌L型难以培养,其营养要求基本与原菌相似,但需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长。
细菌L型生长繁殖较原菌缓慢,一般培养2~7天后在软琼脂平板上形成中间较厚、四周较薄的荷包蛋样细小菌落,也有的长成颗粒状或丝状菌落。
L型在液体培养基中生长后呈较疏松的絮状颗粒,沉于管底,培养液则澄清。去除诱发因素后,有些L型可回复为原菌,有些则不能回复,其决定因素为L型是否含有残存的肽聚糖作为自身再合成的引物。
高渗低琼脂培养基
1.基础培养基:
肉汤。含牛肉浸液和蛋白胨。广泛用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。
2.营养培养基:
基础培养基中加入特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。如血琼脂平板、巧克力血平板。
3.鉴别培养基:
观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物通过指示剂显示来鉴别细菌。 如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU)培养基等。
4.选择培养基:
加入抑制剂抑制标本中杂菌生长, 有助于所选择的细菌种类生长(SS琼脂)。
5.特殊培养基:
厌氧培养基和细菌L型培养基(疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基、高渗培养基)等。