关于ElevATP在运动补剂中的作用与效果

1.它是什么？

ElevATP 是 FutureCeuticals 开发的专利成分，源自专有的苹果果肉提取物和古代泥炭（化石植物）的组合。

它因其对提高体内能量产生的积极影响而变得流行，因此被用于目前市场上的各种氮泵产品。

2.它有什么作用？

ElevATP 可刺激体内 ATP 的产生，这是进行运动或短而剧烈的能量收缩和其他有氧运动时使用的主要能量来源。

可用的 ATP 越多，个人的表现就越好，研究表明补充 ElevATP 可以提高运动表现、功率输出和训练量。

此外，补充ElevATP可改善身体成分并增加瘦肌肉生长。

因此，它已成为长期以来一直用于相同目的的流行成分肌酸的有力竞争者；提高 ATP 水平以增加力量和肌肉增益。因此，除了坚持合理的饮食和训练方案外，补充 ElevATP，

3.我什么时候服用？

为了利用这种成分的性能增强特性，最好在锻炼前大约15-30 分钟服用。

ElevATP 的有效剂量为150mg。

当考虑到 ElevATP 可以用作肌酸的替代品时，这令人印象深刻，根据类型，肌酸需要高达5 克的剂量！

4.需要多长时间起效？

ElevATP 一进入血液就开始发挥作用。这通常需要大约15-30 分钟，具体取决于您吃完最后一餐的时间。

研究表明，当测试对象摄入150 毫克ATP 时，他们的血液测试显示，他们的血液 ATP 水平在60 分钟后增加了40%！

除了坚持合理的饮食和训练方案外，持续使用时，补充 ElevATP 将帮助用户增加力量和肌肉质量。

4.研究文献报告原文

ELEVATP 对全血 ATP 水平的影响：单剂量、交叉临床研究

目的：elevATP 是一种含有植物来源的无机微量元素和苹果多酚的补充剂，此前已证明可提高健康人类受试者的内源性全血 ATP 水平。在本报告中，我们在更大的队列中测试了补充剂，并评估了补充剂对肌肉的影响。方法：20 名健康、禁食和休息的成人受试者参加了这项急性、安慰剂对照、单剂量交叉临床研究。

在测试的第一天给予口服安慰剂，然后在第二天给予单次 150 mg 剂量的 elevATP。在处理前、摄入后 60 和 120 分钟立即收集血液。收集全血ATP、血浆ATP、血红蛋白、血乳酸和血糖水平。之前对一名静息研究对象进行了肌肉活检，60 分钟和 120 分钟后，单剂 elevATP。结果：elevATP 在 60 分钟后将全血 ATP 水平提高了 40%

关键词：血液ATP，血浆ATP，微量营养素，多酚。

介绍

5'-三磷酸腺苷 (ATP) 是细胞内的活性能量来源，并参与许多生理过程。细胞外 ATP 和 ADP 影响血小板聚集、血管张力以及神经、心脏和肌肉组织功能 (1)。ATP 对细胞间通讯至关重要，并参与免疫细胞协调 (2-5)。随着人类年龄的增长，细胞内 ATP 水平会降低，产生 ATP 的能力也会降低 (6-8)。最近的证据还表明，老年人的血浆和红细胞介导的 ATP 释放较低，尤其是在骨骼肌血流量增加期间 (9)。这可能会损害血管舒张和向组织输送氧气 (9)。

口服 ATP 的临床效果参差不齐 (10, 11)。研究人员未能证明口服 ATP 补充剂

增加血液 ATP 水平 (11, 12)。这可能是由于口服 ATP 的生物利用度差 (13)，因为据报道静脉内施用 ATP 会增加 ATP 水平 (14)。长期补充 ATP 可诱导人体肠道核苷转运蛋白，从而增加吸收 (15)。然而，肠溶和远端释放 ATP 补充剂也未能增加血液 ATP 水平 (12)。由于使用直接 ATP 补充的 ATP 给药机制不可预测，包括我们小组在内的研究人员正在探索增加内源性 ATP 水平的策略。

ElevATP 是一种古老的基于泥炭的生物无机材料，与苹果提取物多酚混合，如前所述 (16)。我们的初步研究表明，单剂量的 elevATP 可增加人类受试者的全血 ATP 水平，而不会改变血液中的活性氧、葡萄糖或hytrin乳酸水平 (16)。这项研究在更大的受试者组中使用交叉设计扩展了这项工作。我们试图确认我们初步研究的结果并评估血浆中的 ATP 水平。此外，在单剂量 elevATP 之前和之后从一个个体收集肌肉组织活检，以确定肌内 ATP 水平。

材料和方法

elevATP 由美国伊利诺伊州 Moence 的 FutureCeuticals, Inc. 提供。Dulbecco 磷酸盐缓冲盐水 (PBS)、苯甲磺酰氟 (PMSF)、二甲基亚砜 (DMSO)、亮肽素、EDTA、NaCl、硝基苄基硫代肌苷 (NBTI)、KCl、tricine、毛喉素、异丁基甲基黄嘌呤 (IBMX) 和水来自西格玛化学。公司（美国密苏里州圣路易斯）。如 Gorman 等人所述制备 ATP 稳定溶液。(17) (118 mmol NaCl, 5 mmol KCl, 40 mmol dec 26, 2014 – dec 6, 2013 – 产品名称：lioresal。活性成分：巴氯芬。类别：肌肉松弛剂。缩略图：通用 lioresal用于tricine 缓冲液， 4.15 mmol EDTA、5 nmol NBTI、10 ?mol 毛喉素和 100 ?mol IBMX，pH 7.4，用 2 mol/L KOH 调节）。

低蛋白结合微管购自 Eppendorf (Hauppauge, NY, USA)，RC DC 蛋白检测试剂盒 II 购自 Bio-Rad (Palo Alto, CA, USA)。

ATP-萤光素酶测定获自 Calbiochem (San Diego, CA, USA)。肝素毛细血管采血Cymbalta管购自 Safe-T-Fill (Ram Scientific Inc. Yonkers, NY)。便携式燃气表和 CG8+ 墨盒购自 Abbott Laboratories (Abbott Park, IL, USA)。

总血红蛋白定量 ELISA 试剂盒购自 MyBiosource (San Diego, CA, USA)。Accutrend Lactate Point of Care 和 BM-Lactate Strips 购自 Roche（德国曼海姆）。Accu-Chek Compact Plus 血糖仪和 Accu-Chek 测试条购自 Roche Diagnostics (Indianapolis, IN, USA)。

纳入和排除标准

本临床病例

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研究是根据赫尔辛基宣言中规定的指导方针进行的。所有涉及人类受试者的程序均由 Vita Clinical SA Avenida Circunvalacion Norte #135, Guadalajara, JAL, Mexico 44 270 的机构审查委员会批准（研究方案编号 ABC-13-09-ATP）。选择了二十名受试者参加。他们一般都很健康，没有鼻炎、流感和其他急性感染。

选择了 12 名女性和 8 名男性受试者，年龄范围为 22 至 35 岁，BMI 范围为 24.1 至 30 kg/m?。排除标准包括糖尿病诊断、对饮食产品过敏、使用消炎药、镇痛药、他汀类药物、糖尿病药物、抗过敏药物、多种维生素，以及在研究开始后 15 天内使用补充剂。所有参与者都写了，

采血

登记的参与者被指示在初始抽血前 12 小时内不要进食。在研究的第 1 天，休息的受试者被给予一个空胶囊作为安慰剂，在第 2 天给予 150 毫克封装的 elevATP。每天服用 250 毫升的水和胶囊。

通过手指穿刺收集 200 微升血液并置于 Safe-T-Fill 毛细管采血管 (Ram Scientific Inc. Yonkers, NY) 中。在测试胶囊给药前以及摄入后 60 和 120 分钟收集血样。

用于 ATP 分析的血浆收集

收集后立即将 100 ?l 血液转移至低蛋白结合管 (Eppendorf, Hauppauge, NY, USA)。将等体积的 ATP 稳定溶液 (17) 添加到每个试管中。通过倒置轻轻混合试管并以 13,000 g 离心 3 分钟以沉淀细胞。

将上清液转移到干净的试管中，再次以 13,000 g 离心 3 分钟。然后在 ATP 分析之前将上清液快速冷冻并储存在 -80°C。

ATP 检测和定量

血液 ATP 或血浆 ATP 浓度使用 ATP Assay Kits（Calbiochem，San Diego，CA，USA）对原始方法进行了修改，如前所述[18]。简而言之，将 10 μL 裂解的血液或血浆加载到白板上（Corning Fisher Scientific，Waltham，MA，USA）。添加 100 ?L 含有 1 ?L 萤光素酶混合物的 ATP 核苷酸释放缓冲液，并将板立即置于照度计（LMaX，Molecular Devices；Sunnyvale CA，USA）上。在 470 nm 处每隔 3 分钟读取 15 分钟。

记录相对光单位 (RLU) 并使用标准 ATP 曲线确定 ATP 浓度。

血红蛋白测量

使用双夹心 ELISA (MyBiosource, San Diego, CA, USA) 测定血浆中的血红蛋白水平，根据制造商的说明与标准曲线比较测定浓度。

用 ATP 稳定溶液收集的血浆样品用于该分析。

乳酸和葡萄糖检测

使用 Accutrend Lactate Point of Care (Roche, Mannheim, Germany) 和 BM-Lactate Strips (Roche, Mannheim, Germany) 测量血乳酸。将 15 ?L 血液加载到试纸条上，并根据制造商的说明读取乳酸水平。

使用 Accu-Chek Compact Plus 血糖仪（Roche Diagnostics，Indianapolis，IN，USA）和 Accu-Chek 试纸（Roche Diagnostics，Indianapolis，IN，USA）测量葡萄糖。根据制造商的说明读取葡萄糖。在每个收集时间点测定乳酸和葡萄糖水平。

统计分析

对于从所述测定中获得的每个结果，在摄入 elevATP 或安慰剂之前，将每个受试者标准化为他们自己在基线 (T0) 测量的值。

治疗后 60 (T60) 和 120 (T120) 分钟的每个测定的水平在实验组内与基线和实验组之间使用配对 t 统计检验进行比较。在 GraphPad 中进行描述性分析以得出每组的平均值和标准差。

肌肉活检和外科手术

对于肌肉活检，按照与临床交叉研究所述相同的选择标准，招募了一名 BMI 为 24.5 的 22 岁健康受试者。该临床案例研究是根据赫尔辛基宣言中规定的指南进行的。该程序由 Vita Clinical SA Avenida Circunvalacion Norte #135, Guadalajara, JAL, Mexico 44 270 的机构审查委员会批准（研究方案编号 ABC-NCI-13-01-ATP-Mus1）。如上所述，研究对象选自登记进行全血ATP测量的对象组。

该受试者在该实验期间禁食和休息。使用无菌技术进行活检。将防腐剂溶液（异碘酮）涂在手臂的内侧区域，在右侧二头肌上方。使用 18 g 针头用 5 cc 利多卡因渗入皮肤。使用 3 mm 皮肤活检穿孔器进行皮肤切口。皮下组织被直接分割，允许使用 Metzenbaum 剪刀切除 3 mm2 的二头肌。在摄入 elevATP 之前以及之后 60 和 120 分钟收集二头肌的肌肉组织。将肌肉组织存放在 50 ml 锥形管中，并在测量 ATP 所需的进一步处理之前使用液氮冷冻。

肌肉组织中 ATP 的测量

如 Gorman 等人先前所述，将冷冻的肌肉组织添加到含有 200 μL 冰冷 ATP 稳定溶液的玻璃组织研磨机（Fisher Scientific，Chino，CA，USA）中。(17)。将组织机械研磨并转移到低蛋白结合微管（Eppendorf，Hauppauge，NY，USA）。将样品以 10,000 g 离心 5 分钟，上清液用于 ATP 定量。ATP 浓度使用 ATP 检测试剂盒（Calbiochem，San Diego，CA，USA）对原始方法进行了修改，如前所述 (18)。

根据制造商的说明，还使用双夹心 ELISA（MyBiosource，San Diego，CA，USA）测定肌肉组织裂解物中的血红蛋白水平。在 Gorman 等人描述的 ATP 稳定溶液中均质化的组织样本。(17) 用于该分析。

结果

这项安慰剂对照的交叉研究招募了 20 名健康受试者。受试者禁食过夜，然后给予空胶囊作为安慰剂（第 1 天）。在基线（治疗前）和治疗后 60 分钟（T60）和 120 分钟（T120）收集血液。

受试者禁食过夜，在第 2 天之前，给每个受试者服用含有 150 mg elevATP 的单个胶囊。如前所述获得血液。还测定了血液 ATP 和葡萄糖，以及血浆 ATP 和血红蛋白水平。

图 1：elevATP 对血液 ATP 水平的影响。elevATP 在 T60 时显着增加血液 ATP 水平 40%

单剂量 150 mg elevATP 在 60 分钟时显着增加血液 ATP 40%（p

在基于荧光素酶的测定中，使用 10 ?L 血浆测量血浆 ATP 水平。在接受 elevATP 治疗的患者中，T60 (p=0.83) 或 T120 (p=0.69) 时的 ATP 水平没有显着增加（图 2）。用安慰剂治疗后血浆 ATP 水平没有变化。

测定所有血浆样品中的血红蛋白水平，以确保红细胞的机械破坏不会影响血浆 ATP 水平。与 T0 基线相比，安慰剂组在 T60 时血浆血红蛋白增加了 34%，在 T120 时增加了 37%（图 3）。在用 elevATP 治疗后的第 2 天，与新的 T0 基线相比，血浆血红蛋白水平在 T60 时增加了 4%，在 T120 时增加了 28%。在 T60 (p=0.29) 和 T120 (p=0.76) 时，安慰剂和 elevATP 治疗没有统计学上的显着差异。

图 2：用 elevATP 处理后的血浆 ATP 水平。数据表示为平均值 +/- SE，数据表示为基线 T0 的百分比变化。n=20。

如前所述，在用安慰剂治疗后（第 1 天）和 elevATP 后（第 2 天）监测血糖水平。在接受检查的 20 名患者中，T60 (p=0.57) 或 T120 (p=0.59) 治疗之间的血糖水平没有显着差异。服用安慰剂（第 1 天）或 elevATP（第 2 天）后，血乳酸水平保持不变。在 T60 (p=0.61) 或 T120 (p=0.44) 治疗之间的差异不显着。

图 3：用 elevATP 治疗后的血红蛋白水平。T60 增加了 4%，T120 增加了 28%。与安慰剂相比，没有统计学差异。数据表示为平均值 +/- SE，n=20。

在施用 elevATP 之前和之后测定二头肌的 ATP 水平。在 T0（治疗前），每毫克蛋白质检测到 210 pg ATP（图 4）。肌肉活检组织中的 ATP 水平在 60 分钟时增加到 590 pg/mg 蛋白质，在 120 分钟时增加到 910 pg/mg 蛋白质。血红蛋白也在肌肉活检裂解物中进行了量化，以确保组织的机械破坏不会影响 ATP 水平（图 5）。治疗后血红蛋白水平没有增加。

图 4：用 elevATP 处理后肌肉组织中的 ATP 水平。治疗后ATP水平显着升高。数据表示为 4 次测定的平均值 +/- SE。

图 5：血红蛋白水平

讨论

这些发现为以下断言提供了进一步的支持：口服 elevATP 会增加健康人全血中的 ATP 水平。这里报告的增长与我们之前的报告一致（16）。elevATP 似乎可以选择性地急剧增加血液细胞成分中的 ATP 水平。相反，在摄入 elevATP 后，无细胞血浆中的 ATP 水平保持不变。我们通过量化血浆中的血红蛋白浓度来验证红细胞膜的完整性。这表明 ATP 并非源自破裂的红细胞。同样，我们发现用 elevATP 处理后血浆 ATP 水平没有变化，这表明 elevATP 不太可能影响细胞外 ATP 水平。

红细胞构成血液中最大的细胞成分，约占血液体积的 40% 至 50%。红细胞是 ATP 的主要载体 (19-21)，细胞内浓度达到毫摩尔范围 (17, 22)。红细胞中 ATP 的产生是通过糖酵解而不是在线粒体内产生的 (19)。我们之前曾报道，禁食和休息研究对象摄入 elevATP 不会改变血乳酸水平，这可能是由于在这些实验条件下红细胞中糖酵解和 ATP 生成增加而产生的 (16)。这些结果表明红细胞对全血 ATP 水平的升高没有贡献。

收集新鲜全血并立即裂解以测量总 ATP。这包括源自收集的血液中存在的所有类型细胞的 ATP。血糖和乳酸水平没有变化表明 ATP 来源于具有线粒体的血细胞，例如血小板和白细胞。与红细胞不同，血小板确实含有线粒体。血小板中每毫克血小板蛋白含有大约 40 nmol 的 ATP 和 ADP (23)。血小板可以通过凝血酶激活来刺激，以达到低微摩尔浓度的 ATP 和 ADP (24)。

我们的肌肉活检案例研究进一步支持了细胞内器官 ATP 形成的增加。如本文所述，富含线粒体的肌肉组织在摄入 elevATP 后表现出 ATP 水平显着增加。更多志愿者的额外工作正准备确认 elevATP 对静息受试者肌肉内 ATP 水平的刺激作用。我们之前的工作表明，尽管增加了 ATP 水平，但 elevATP 并未增加活性氧种类 (16)。elevATP 与线粒体复合物 IV 和/或 V 活性之间的关系目前正在我们实验室进行研究，并确定摄入 elevATP 前后的 ATP/磷酸肌酸比例

总之，我们因此证实了 elevATP 提高全血中 ATP 水平的能力。我们进一步表明，elevATP 不会增加血浆中的 ATP 水平。对 elevATP 的作用敏感的确切血细胞类型或类型尚不清楚。一项临床案例实验表明，摄入单剂量的 elevATP 会导致静息条件下肌肉内 ATP 的显着增加。该结果表明摄入 elevATP 可能会增加其他组织中的 ATP 水平。进一步的临床测试是合理的，需要确认这一初步结果。调查 elevATP 是否可以提高年轻人和老年人的肌肉性能和耐力，这样的实验也是合理的，目前正在准备中。