温馨提示：道路千万条，学习第一条，带你全面了解多糖的检测方法

西安赛邦生物温馨提醒您，道路千万条，学习第一条，平时不努力，业绩两行泪。熟知检测方法，轻松应对客户拿大单。今天我们要讲的是多糖。提起植物多糖我们并不陌生，枸杞多糖，灵芝多糖等等，但是对于多糖的检测方法你了解多少，通用的检测方法有哪些，每种方法有哪些区别，今天就让我们系统的梳理下关于多糖的检测方法。

多糖的通用检测方法

农业部标准：

1苯酚-硫酸法

原理：多糖在浓硫酸作用下，水解成单糖分子，并迅速脱水生成糖醛，然后糖醛与蒽酮缩合成糖醛衍生物，呈蓝绿色，颜色稳定，在(624±1)nm处有特征吸收，可测定多糖含量，结果较为准确。

适用范围：几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖，而且可以测所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等

药典标准：

2硫酸-蒽酮法

原理：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10－100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。

适用范围：苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定。

说明：

目前我们通用的就是药典和农业部关于多糖的检测方法；苯酚硫酸法与硫酸蒽酮法检测差别根据具体产品来，没有特点规律，或者说植物多糖的规律都没特定的。拿猴头菇多糖来举例，苯酚硫酸法检测20%以上，硫酸蒽酮法检测含量高达50%多，而灵芝，茯苓，枸杞等多糖不具备类似的规律！加上辅料糊精的影响，加大了不确定性。多糖检测环节，对照品也是很关键的。以我们企业现在的技术水平，标定不了那么纯的对照品。所以，总结来说，多糖检测方法，带有经验值，除了根据检测，还需要看色，尝味，前后能对上，质量就不会有错。苯酚硫酸法较硫酸蒽酮稍微准确些，除去了小分子单糖，寡聚糖。

知识拓展：

如何区分小分子糖（单糖和寡糖）与多糖

一般采用80%乙醇处理。因为小分子糖可以溶于80%乙醇，多糖则不溶。通过此法将两者分离，在分别测定含量就不会有干扰了。

具体做法分两种：

1，一种是将提取物（或生药 ）用80%乙醇提取，提取液得到小分子糖，提取后的残余物在用水提，得到多糖。

2，将提取物的溶液加乙醇至80%，得到上清液为小分子糖，沉淀再用水溶解极为多糖。

保健品多糖检测方法保健品方法叫白鸿法或王光亚法又分为四种

1.粗多糖硫酸蒽酮法

原理：

多糖经乙醇沉淀分离后，去除其他可溶性糖及杂质的干扰，糖与硫酸在沸水欲中加热脱水生成羟甲基呋喃甲醛（羟甲基糠醛），再与蒽酮缩合成蓝绿色化合物，其成色强度与溶液中糖度成正比，在620nm波长下比色定量。

波长：620nm

适用范围：

几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖，而且可以测所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等。

2.粗多糖苯酚-硫酸法

原理：

糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10－100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。

波长：485nm

适用范围：

苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定。

3.粗多糖碱性酒石酸铜滴定法

原理：

样品多糖沉淀物经酸解后，全部转化为单糖，单糖具有还原性，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，以亚甲蓝作指示剂，根据样品液消耗的体积计算还原糖的含量，再乘以换算系数0.9计算多糖含量。

适用范围：

本法适用于各类食品中以葡聚糖为主要结构，相对分子质量1乘以10*4的水溶液性粗多糖的测定。本方法最低检测浓度为5.0mg/L.

4.葡聚糖分光光度法

原理：

样品多糖经80%乙醇沉淀之后,加入铜试剂,选择性地从其它高分子物质中沉淀出葡聚糖,沉淀部分与苯酚-H2SO4反应,生成有色物质在485nm条件下比色,检测发现有色物质的吸光值与葡聚糖成正比。

波长：485nm

适用范围：本方法适用用各类食品中以葡聚糖为主要结构，相对分子质量1乘以10*4以上的水溶性粗多糖的测定。本方法最低检出浓度为5mg/L.

结论

多糖的检测方面目前碱性酒石酸铜滴定法，比色法（蒽酮，苯酚硫酸法），一般来说，比色法的灵敏度高，达 μg/mL.而碱性酒石酸铜为mg/mL，样品用量少，但缺点是一般测定以葡萄糖作为对照品，误差大，实际应以被测物 的纯度作对照品，以求出换算因子，但要制备被测物的纯品并非每个实验室所能做到的，而且保健食品中往往是多种中草药的提取物作为原料而制成，所含多糖是不同相对分子量多糖的混合体，这就给提取纯品增加了难度。常用的方法为硫酸蒽酮法和苯酚硫酸法目前农业部版本比较认可的是苯酚硫酸法。