辅酶q10有几种提取工艺,分别是什么?

背景技术：

辅酶q10具有促进氧化磷酸化反应和保护生物膜结构完整性的功能，是广泛存在于生物体内的脂溶性醌类化合物。辅酶q10在体内呼吸链中质子移位及电子传递中起重要作用，它是细胞呼吸和细胞代谢的激活剂，也是重要的抗氧化剂和非特异性免疫增强剂。因此，辅酶q10具有良好的医学应用前景。

辅酶Q10辅酶Q10与维生素E相似，但或许是个更强的抗氧化剂。它也被称作泛醌。有一种常见的辅酶Q，但只有辅酶Q10见于人体组织。Q10随着年龄渐增而渐减，宜由饮食中补充。它在免疫系统的功效及老化的作用上扮演举足轻重的角色。 新英格兰机构曾报导说，单单辅酶Q本身，就足以减低患有肿瘤及血癌的实验动物之死亡率。临床试验正与化学疗法并用，以减低这些药物的副作用。在日本，它被用来治疗心脏疾病及高血压，且也被用来增强免疫系统。研究已显示使用辅酶Q10有益于..admin去查看
技术实现要素：

本发明提供了一种新型制备辅酶q10的方法。采用细菌发酵、化学皂化、洗脱方法制备辅酶q10。利用光合细菌发酵后离心得到浓缩菌泥，再进行破壁得到破壁菌体，对破壁菌体皂化后用石油醚进行萃取得辅酶q10粗制品，将粗制品进行吸附、洗脱、浓缩等制成符合注射剂要求的静脉注射制剂，纯度达93.4％。为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案予以实现：

一种辅酶q10的提取制备方法，其特征在于：采用细菌发酵、化学皂化、洗脱方法制备辅酶q10。

在发明的技术方案中，还具有以下技术特征：包括如下步骤：

(1)细菌发酵：将培养用水加入透光容器后，加入培养用水重量0.1％的消毒剂，搅拌均匀、静置后过滤得灭菌清液；向灭菌清液中加入培养用水重量1％的细菌培养剂，充分溶解、搅匀后得培养液，向培养液中加入沼泽红假单胞菌种液并搅拌均匀；把已接种好的沼泽红假单胞菌分装至发酵容器中，置于室外有光照处，每日搅拌十次以上，15-40℃条件下培养2-5天至生物量达108时采收；

(2)离心浓缩：将采收的沼泽红假单胞菌菌液用离心机离心，使离心率达95％以上，得到浓缩菌泥；

(3)破壁处理：将浓缩菌泥放入细胞破碎机进行破壁处理，控温10℃以下，压力10000pa，反复两次，使菌体破壁率达90％以上，以得到破壁菌体；

(4)皂化处理：向每150kg的破壁菌体中加入焦性没食子酸700g，氢氧化钾5kg，甲醇35kg和纯净水50l，混合均匀后放入反应釜中回流30min，然后迅速冷却至室温；

(5)萃取回收：向反应釜中加入石油醚萃取2次，每次加入的石油醚的体积数与步骤(4)中破壁菌体的质量数的比值为1:1，然后快速搅拌5分钟，在温度为20℃条件下静置1h后分离萃取液，将两次萃取液合并回收；将反应釜升温至65℃，经挥发回收残留石油醚，反应釜中所剩物即为辅酶q10粗制品；

(6)纯化处理：具体步骤包括：ⅰ.将辅酶q10粗制品用无水乙醇溶解后制成体积百分比浓度为20％的辅酶q10乙醇溶液；ⅱ.将辅酶q10乙醇溶液加入反应釜中，每100l辅酶q10乙醇溶液中加入树脂30kg，持续搅拌30min，使辅酶q10充分被树脂吸附，然后分离取出树脂；ⅲ.将吸附有辅酶q10的树脂用丙酮解析洗脱2次；ⅳ.将两次丙酮洗脱液进行合并，减压到常压101325pa，回收丙酮后得到辅酶q10浓缩液；ⅴ.将浓缩液在0℃条件静置过夜24小时有结晶体析出，回收结晶体经干燥后得纯品，纯度达93.4％。

与现有技术相比，本发明的优点和积极效果是：

本发明的细菌发酵、化学皂化、洗脱方法制备辅酶q10的方法，制备的辅酶q10纯度达93.4％，且此方法较其它方法具有步骤简单，操作可控，提取程度高、稳定性强和生产成本低的优点。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

(1)细菌发酵：将培养用水加入透光容器后，加入培养用水重量0.1％的消毒剂，搅拌均匀、静置后过滤得灭菌清液；向灭菌清液中加入培养用水重量1％的细菌培养剂，充分溶解、搅匀后得培养液，向培养液中加入沼泽红假单胞菌种液并搅拌均匀；把已接种好的沼泽红假单胞菌分装至发酵容器中，置于室外有光照处，每日搅拌十次以上，30℃条件下培养5天至生物量达108时采收；

(2)离心浓缩：将采收的沼泽红假单胞菌菌液用离心机离心，使离心率达90％以上，得到浓缩菌泥；

(3)破壁处理：将浓缩菌泥放入细胞破碎机进行破壁处理，控温10℃以下，压力10000pa，反复两次，使菌体破壁率达90％以上，以得到破壁菌体；

(4)皂化处理：向每150kg的破壁菌体中加入焦性没食子酸700g，氢氧化钾5kg，甲醇35kg和纯净水50l，混合均匀后放入反应釜中回流30min，然后迅速冷却至室温；

(5)萃取回收：向反应釜中加入石油醚萃取2次，每次加入的石油醚的体积数与步骤(4)中破壁菌体的质量数的比值为1:1，然后快速搅拌5分钟，在温度为20℃条件下静置1h后分离萃取液，将两次萃取液合并回收；将反应釜升温至65℃，经挥发回收残留石油醚，反应釜中所剩物即为辅酶q10粗制品；

(6)纯化处理：具体步骤包括：ⅰ.将辅酶q10粗制品用无水乙醇溶解后制成体积百分比浓度为20％的辅酶q10乙醇溶液；ⅱ.将辅酶q10乙醇溶液加入反应釜中，每100l辅酶q10乙醇溶液中加入树脂30kg，持续搅拌30min，使辅酶q10充分被树脂吸附，然后分离取出树脂；ⅲ.将吸附有辅酶q10的树脂用丙酮解析洗脱2次；ⅳ.将两次丙酮洗脱液进行合并，减压到常压101325pa，回收丙酮后得到辅酶q10浓缩液；ⅴ.将浓缩液在0℃条件静置过夜24小时有结晶体析出，回收结晶体经干燥后得纯品，纯度达93％。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

辅酶Q10辅酶Q10与维生素E相似，但或许是个更强的抗氧化剂。它也被称作泛醌。有一种常见的辅酶Q，但只有辅酶Q10见于人体组织。Q10随着年龄渐增而渐减，宜由饮食中补充。它在免疫系统的功效及老化的作用上扮演举足轻重的角色。 新英格兰机构曾报导说，单单辅酶Q本身，就足以减低患有肿瘤及血癌的实验动物之死亡率。临床试验正与化学疗法并用，以减低这些药物的副作用。在日本，它被用来治疗心脏疾病及高血压，且也被用来增强免疫系统。研究已显示使用辅酶Q10有益于..admin去查看

技术特征：

技术总结
一种辅酶Q10的提取制备方法，本发明公开了辅酶Q10注射液及其制备方法，其制备方法是利用光合细菌发酵后离心得到浓缩菌泥，再进行破壁得到破壁菌体，对破壁菌体皂化后用石油醚进行萃取得辅酶Q10粗制品，将粗制品进行吸附、洗脱、浓缩等制成符合注射剂要求的静脉注射制剂，纯度达93.4％。本发明方法步骤简单，操作简便，原理可靠，设计科学，成本低廉，溶剂平均回收率高，条件可控，提取效率高，产品纯度好。

技术研发人员：刘乃山;马雪
受保护的技术使用者：青岛华迈士药业有限公司
技术研发日：2017.12.14
技术公布日：2019.07.02