纳豆激酶提取物

纳豆在发酵过程中，由纳豆枯草杆菌产生一种丝氨酸蛋白酶。纳豆激酶具有纤溶活性，可以治疗和预防血栓疾病。

英文名：NattoKinase

结构类型：单链多肽，碱性蛋白酶 #FormatImgID_1#

1.纳豆激酶的稳定性

pH稳定性

在自然pH值状态下，相对比较稳定，在pH值从7升至12时，室温下10min内稳定;pH值低于5时，则极为不稳定，很快失去活性;当温度超过60时则迅速因蛋白变性而失活。反复冻融五个循环时，其活性仍保存95%以上，从而表明冻融对纳豆激酶的活性无较大影响。当纳豆激酶与煮沸的小麦提取液、煮沸的肉汤以及血清蛋白和胃粘液蛋白混合后，纳豆激酶的稳定有明显增加，甚至在酸性pH值时，酶活性也并不完全失掉。

热稳定性

在温度低于45°C时活性相对稳定，高于60°C则因蛋白质变性而迅速失活，冻融对纳豆激酶的活性无较大影响，反复冻融5次后，该酶仍能保持95%以上的活性。

金属离子稳定性

纳豆激酶的活性还受一些金属离子的影响，Hg2+会使其完全失活，Cu2+、Zn2+、Al3+、Ca2+等离子对该酶有不同的抑制作用，而Mg2+、Co2+则对其有激活作用。

其他物质稳定性

E-ACA和EDTA对纳豆激酶活性无明显影响，而PMSF能完全抑制其活性。1mmol/L的DFP和neguvon则能完全抑制纳豆激酶的活性。

2分子量

纳豆激酶是一种单链多肽酶，由于测定分子量的技术方法不同，因此所测得到的分子量也有明显不同。用SephadexG100柱凝胶过滤法，得到的结果为20000，用园二色方法测定为27300。根据氨基酸顺序计算出该酶的准确分子量为27.728。

3.PI值（等电点）

用Svunsson的柱型电泳法，等电聚焦测定纳豆激酶具有对称的单一的纤溶酶峰，其PI值为8.6±0.3。等电点可以提供在分离提纯纳豆激酶时，考虑调pH值在PI值附近，有利于酶的纯化。

4.纳豆激酶的底物特异性

NK作为丝氨酸蛋白酶，其酰胺水解活性可通过许多合成底物进行观察。对纳豆激酶最敏感的底物为血浆纤溶酶的底物，即S2251;对底物H2DLArgPNA，S2238，S2266和S2302具有一定的活性，而对S2444和S2484则明显地无活性。纳豆激酶有其特异的水解蛋白的氨基酸作用和识别位点。

纳豆激酶的4种功效及副作用

更特别的是纳豆激酶比起医生常用的的溶血栓药物尿激酶(Urokinase)来的更安全且效用更高，一般心肌梗塞发作而处于危险状态的患者，会立即使用尿激酶(约20万单位)，但在体内只有半小时的溶血栓效果，但只要吃一盒(约100公克的纳豆)，就可发挥约8到12小时的溶血栓功效，是药物的20多倍。

而且纳豆激酶只溶解血栓造成的纤维蛋白，不会有药物造成的出血等多种副作用，是非常完美的药物天然替代品。

纳豆激酶经科学验证的功效

1．预防及溶解血栓

现代人饮食西化，常吃下过多的高脂肪及碳水化合物，蔬菜水果又吃太少，造成血管出现血栓提早老化，甚至有10多岁就发现血管硬化，20岁就中风的案例。

血栓虽然被视为坏东西，但其实在体内它有修复血管及止血功能，而任务完成时就会被血栓溶解酵素给分解掉，一旦这种酵素减少分泌或失去功能，体内血栓便会快速增加，并引起心肌梗塞、脑中风及血管型失智等疾病。

NutritionResearch期刊曾于2009年发表研究指出，针对心血管疾病的高风险患者，每日服用2,000FUs的纳豆激酶两次，两个月后抽血发现血栓大幅下降，对于心血管有保护作用，能避免心肌梗塞、脑中风的发生。

2．降血压

高血压常被认为是要一辈子吃药控制的疾病，但现在临床研究发现纳豆激酶就有显着的降血压功效，而且还没有西药带来的诸多副作用。

HypertensionResearch期刊于2008年曾刊载一则研究，指出高血压患者连续八周服用2,000FUs的纳豆激酶，能让血压显着下降，这是由于纳豆激酶能抑制让血压提升的酵素，因此纳豆激酶能预防甚至治疗高血压的发生。

3．预防老年失智症

失智.痴呆，我想是你我到老年都会害怕得到的疾病，不仅会渐渐遗忘熟悉的人，在生活上还会失去自理能力，而老年失智症或是痴呆不外乎是脑血管老化、阻塞导致氧气及养份无法输送至脑部而发生。

华人较常发生的"血管型失智"多半是由于脑内微血管被血栓堵住所引起，因此服用纳豆激酶能溶解血栓，预防失智。

而国外常见的另一种退化型失智"阿兹海默症"，则是与大脑淀粉斑块不正常堆积及神经纤维纠结有关，JournalofAgriculturalandFoodChemistry期刊在2009年曾发布研究指出，服用纳豆激酶能分解这类淀粉斑块，因此有治疗及预防阿兹海默症的潜力。

4．降胆固醇

胆固醇过高是健检常见的红字项目，坏胆固醇过多，血管容易形成斑块，引发阻塞，一旦发生感染、天气变冷、暴怒等状况，就容易引发中风、心肌梗塞、猝死等危机。

AsiaPacificJournalofClinicalNutrition(亚洲临床营养学期刊)在2009年曾发表一则研究，指出纳豆激酶搭配红麴萃取能有效降低总胆固醇.坏胆固醇.三酸甘油脂并且能提升好胆固醇。

更重要的是使用这些营养品不会有降胆固醇西药史他汀(Statin)带来的诸多副作用(如疲倦.心脏无力.丧失记忆.肌肉疼痛.肝脏受损)。

纳豆激酶的副作用

纳豆激酶

正常使用下是安全无虞的，但由于纳豆激酶具有抗凝血特性，因此符合以下条件请勿使用(若误用可能增加出血风险)，或使用前请务必谘询医生：

1.如果身体有出血伤害如胃溃疡、痔疮或创伤;

2.手术前2周;

3.正服用抗凝血药物如warfarin,aspirin,heparin或者是消炎药ibuprofen。

由于纳豆激酶有降血压的功效，若患有低血压及严重贫血者请勿使用，因为它会使血压降低，进一步导致恶心及头晕的可能，还有孕妇也请勿使用。

基因结构

基因与蛋白质结构

NakamuraT于1992年首次对一株纳豆芽孢杆菌NC21中的NK基因进行了研究，报道了包括调控顺序在内的1473bp的NK全基因序列[5]。NK基因从第181个碱基开始，以GTG为起始密码子，随后是1143bp组成的阅读框架，分为三个部分(见图1):分别是信号序列(signalsequence)、前序列(prosequence)和成熟序列(maturegene)，相应的编码29个氨基酸的信号肽(signalpeptide)、77个氨基酸的前肽(propeptide)和275个氨基酸的成熟肽(maturepeptide)。结构基因的3末端为连续的三个终止密码子TAA，TAG，TAA。终止密码子之后一段序列可形成茎环结构，即因子非依赖性终止顺序。起始密码子上游17bp处为核糖体结合位点AAAGGAG。SD序列上游是一个AT含量高达72%的转录调控区域，但在此区域尚未找到与已知枯草杆菌启动子相类似的保守序列。

蛋白质结构

根据NK基因的DNA序列推出其氨基酸序列的一级结构，确定纳豆激酶由275个氨基酸组成，是一种单链多肽酶，其含有8个赖氨酸残基，肽酶可将其水解成9个小肽，该酶的活性部位在Asp32，His64，Ser221处，底物结合部位在Ser125，Leu26和Gly127处。NK基因的阅读框序列推导的氨基酸组成显示其共编码381个氨基酸，其中N端29个氨基酸组成信号肽(signalpeptide)，随后的77个氨基酸组成前肽(propeptide)，成熟肽组成与氨基酸序列测定相符。

分离纯化 有关纳豆激酶辨别纯化的研究报导，绝大年夜大年夜局部采纳的是传统的蛋白质辨别纯化手段，瓜代应用沉淀、盐析、离心、过滤和色谱等技能。

 

1.经过过程硫酸铵分级沉淀、CM-SepharoseF.F.柱层析、冷冻古板获得纳豆激酶。优化了纳豆激酶辨别纯化工艺。

2.以SubtilisinCarlsberg为摹拟蛋白，以AOT/isooctane反胶团系统为无机相，应用AOT/isooctane反胶团系统从发酵液平辨别纯化纳豆激酶.纳豆激酶经过一次萃取轮回，蛋白质收受采取率约为33.25%，酶朝气收受采取率达到80.2%，纯化因子约为2.5旁边.